鱼类胃蛋白酶的特征研究是鱼类生理生化研究的重要内容之一,也是鱼类配合饲料研制的理论基础与依据,对养殖鱼类饵料配置具有重要的指导意义。海水黄鳍鲷和淡水鳜鱼胃蛋白酶原的纯化和酶的性质研究,迄今为止,国内外未见报道。本文以海水黄鳍鲷和淡水鳜鱼为材料,通过硫酸铵盐析、DEAE-Sephacel离子交换以及SephacrylS-200凝胶过滤等方法首次分别从其胃内纯化得到四种胃蛋白酶原,并对该酶的相关性质进行了比较研究,为胃蛋白酶的开发利用提供实验依据,也为这两种极具经济价值鱼类的消化生理研究打下基础。SDS-PAGE显示纯化得到四种黄鳍鲷的胃蛋白酶原(PG-I,PG-II,PG-III和PG-IV)的分子量分别为36,32,32以及34kDa;鳜鱼的四种胃蛋白酶原(PG-I,PG-II,PG-III(a)及PG-III(b))的分子量分别约为36,35,38以及34kDa。在pH2.0下,各胃蛋白酶原能在短时间内转化成为活性态的胃蛋白酶,它们的相对分子量均约为30kDa。以酸变性牛血红蛋白为底物,四种黄鳍鲷胃蛋白酶的最适pH为3.0-3.5,最适温度为45-50℃。四种鳜鱼的胃蛋白酶的最适pH为3.5,最适温度为40-45℃。八种胃蛋白酶都属于酸性蛋白酶(天冬氨酸蛋白酶),pepstatin是它们的有效抑制剂,但抑制效果略有不同。四种黄鳍鲷胃蛋白酶对酸变性血红蛋白的Km值分别为:8.7×10-8,1.0×10-7,8.6×10-8和7.3×10-8mol/L,鳜鱼的Km值分别为:2.3×10-7,1.2×10-7,2.4×10-8和1.3×10-7mol/L。以黄鳍鲷PG-I和PG-II制得的一次抗体作Westernblot显示PG-II能与黄鳍鲷四种蛋白酶都能发生强烈的免疫交叉反应,而PG-I除与P-I能发生强烈反应以及与P-II有微弱反应外,与其他两种蛋白不反应。分析鳜鱼PG-I和PG-II的N端前12个氨基酸序列,发现两者的同源性达92%。