不同浓度高氧对大鼠肺组织NF-κB和IL-8表达的影响

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目的:研究成年大鼠持续吸入浓度不同的高氧,肺组织NF-кB以及IL-8表达水平的变化,探讨高氧肺损伤(HILI)的相关机制及其临界浓度值。方法:SD雄性大鼠,32只,采用随机方式分为:对照组(吸入空气21%O2)、50%O2组、70%O2组和90%O2组,四组所吸入时间均为96h。光镜下,观察其肺组织病理改变的特点,分别使用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、酶联免疫吸附法(ELISA法)对肺组织NF-кB p65m RNA表达水平,支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-8含量进行测定,计算BALF中性粒细胞数目及肺组织湿/干重比值(W/D)。结果:1.肺组织W/D结果示:90%O2组W/D(5.887±0.514),可以得出其结果明显高于对照组(4.167±0.298)、50%O2组(4.342±0.303)以及70%O2组(4.568±0.368)的测定结果(均P<0.01),而对照组、50%O2组和70%O2组各组肺组织W/D测定结果的比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。2.BALF中性粒细胞数目示:90%O2组BALF中性粒细胞计数(5.331±0.286),可以得出其结果明显高于对照组(2.232±0.166)、50%O2组(2.316±0.193)以及70%O2组(2.476±0.218)(均P<0.01),而对照组、50%O2组和70%O2组各组中性粒细胞计数测定结果的比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。3.肺组织NF-кB p65m RNA表达的结果示:90%O2组肺组织NF-кB p65m RNA表达水平(3.249±0.266),可以得出其结果明显高于对照组(0.391±0.115)、50%O2组(0.421±0.117)以及70%O2组(0.460±0.117)的测定结果(均P<0.01),而对照组、50%O2组和70%O2组各组肺组织NF-кB p65m RNA测定结果的比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。4.BALF中IL-8含量测定结果示:90%O2组BALF中IL-8含量(60.319±10.926),可以得出其结果明显高于对照组(30.856±4.632)、50%O2组(33.956±6.546)以及70%O2组(38.430±7.036)的测定结果(均P<0.01),而对照组、50%O2组和70%O2组各组BALF中IL-8含量测定结果的比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。5.肺组织NF-кBp65m RNA表达与IL-8含量相关性分析:随着吸氧浓度的增加,各组大鼠肺组织NF-κBp65 m RNA及BALF中IL-8含量,呈正相关关系(r=0.858,P<0.001)6.HE染色结果示:随着吸入氧气浓度的逐渐升高(尤其是氧气浓度90%以上),肺组织的损伤程度出现进行性加重。结论:1.当氧气浓度在50%~70%之间,持续时间96h,对肺组织的损伤较轻,各检测指标较正常组(21%O2)大鼠未见明显异常,而当吸入氧气浓度超过90%且持续时间达到96h以上,即可导致大鼠肺组织发生损伤,而相应的各检测指标的含量也出现明显异常;2.HILI可能与高氧促使肺组织NF-кB的高表达,NF-кB又使IL-8的产生增多,进而使中性粒细胞发生聚集,导致肺部的炎性反应相关。
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