肾气丸“少火生气”配伍对2型糖尿病阳虚证大鼠骨骼肌线粒体功能的影响

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目的:观察肾气丸“少火生气”配伍对2型糖尿病阳虚证大鼠骨骼肌线粒体ATP、ADP、AMP含量和呼吸链复合体、ATP酶活性以及超微结构的影响,探讨肾气丸治疗2型糖尿病阳虚证现代生物学基础。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组12只和造模组48只,造模组48只大鼠予以高糖高脂饲料喂养3周后,采用小剂量链脲佐菌素加氢化可的松注射造模,观察2周制备2型糖尿病阳虚证大鼠,随机分为模型组、肾气丸组、补阳组、罗格列酮组。用血糖检测仪检测大鼠空腹血糖,用放射免疫法检测大鼠血清胰岛素,用全自动生化仪测定大鼠血脂,采用酶联免疫分析(ELISA)法分别测定大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体及ATP酶的活性,用高效液相色谱法检测大鼠骨骼肌线粒体内ATP、ADP及AMP含量,电镜下观察骨骼肌超微结构。结果:(1)造模成功后,大鼠在症状与体征方面出现畏寒喜暖,拱背蜷缩,喜扎堆,毛发竖立甚至脱落,行动迟缓,活动减少,饮水以及摄食量均减少,肛周污染等阳虚证症状。(2)与正常组比较,模型组FBG、INS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C均明显增高,线粒体ATP酶、呼吸链复合体的活性以及ATP、ADP含量明显降低,AMP含量明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,肾气丸组、罗格列酮组FBG、INS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C均明显降低,线粒体ATP酶、呼吸链复合体的活性以及ATP、ADP含量明显增高,AMP含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),但补阳组差异无统计学意义(P>0.05)。(3)与正常组相比,模型组大鼠骨骼肌肌原纤维排列紊乱,Z线、M线模糊且排列紊乱,线粒体形状不规则,体积明显偏小,多数线粒体出现空泡,膜溶解并相互连接;与模型组相比,肾气丸组和罗格列酮组大鼠骨骼肌肌原纤维排列较整齐,Z线、M线清晰且整齐,线粒体体积变大,空泡样变少;与肾气丸组相比,补阳组大鼠骨骼肌排列较紊乱,Z线、M线模糊且排列没有规则,线粒体结构不完整,空泡洋变多,且体积偏小。结论:1.经过肾气丸的治疗后,2型糖尿病阳虚证大鼠血糖、血脂水平明显降低,胰岛素抵抗指数有所改善,该药物有很好的降糖、降脂功效。2.经过肾气丸的治疗后,2型糖尿病阳虚证大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及ATP酶活性水平均有所恢复;骨骼肌线粒体内ATP、ADP含量增加,AMP含量减少,EC值增大;骨骼肌线粒体超微结构的病理变化得以改善;从而调节了大鼠骨骼肌线粒体功能及机体能量代谢,这可能是肾气丸“少火生气”配伍能够治疗2型糖尿病阳虚证的现代生物学基础。
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