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目的:肺水肿是急性肺损伤特征之一,常因气道炎症导致肺微血管内皮细胞损伤,导致肺水渗透增加,加重肺水肿。目前尚无有效药物对这一症状进行改善,炎症小体激活,趋化炎症因子聚集,可能是导致肺水肿的重要因素。NLRP1炎症小体参与多种机体急性炎症,关于其机制尚未明确。本研究通过在体内、体外实验就NLRP1炎症小体探讨导致肺水肿的机制,为改善肺通气、治疗急性肺损伤提供新的临床思路。方法:1、NLRP1炎性小体在急性肺损伤SD大鼠中的作用:2.1.百草枯灌胃制作SD大鼠急性肺损伤模型,分别在造模前及造模后予小动物肺功能检测仪检测大鼠0.3sFEV/FVC（0.3秒用力呼气容积与用力肺活量比值）及MMEF（最大呼气中期流速）;2.2.肺功能检测完毕,使用颈椎脱臼法处死大鼠,右肺行HE病理切片,显微镜观察肺组织病理变化;2.3.取右肺组织行WB,qPCR检测各组织中NLRP1、caspase-1、IL-18表达水平;所有结果均以均值±标准差表示,应用SPSS 24.0软件对数据进行统计分析,采用单因素方差分析检验,若P＜0.05则认为差异有统计学意义。2、NLRP1炎性小体在LPS诱导肺微血管内皮细胞（HPMECs）损伤中的影响:1.1.使用 CCK8 试剂盒测定脂多糖（LPS）、PDTC（Pyrrolidinedithiocarbamate ammonium）对人肺微血管内皮细胞（human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMECs）的半抑制浓度（IC50）,LPS建立急性肺损伤模型,PDTC干预浓度;1.2.将细胞分为Control（正常组）、LPS+ATP（急性损伤组）、LPS+ATP+PDTC（干预治疗组）、PDTC组（PDTC组）4个组;1.3各组细胞分别用CCK8、划痕实验流式细胞术、细胞免疫荧光检测抑制NF-κB表达后HPMECs急性损伤前后区别,各组细胞迁移、增殖及凋亡的变化;1.4.用WB、qPCR检测各组细胞NLRP1炎性体、caspase-1、IL-18表达含量的变化。所有结果均以均值±标准差表示,应用SPSS 24.0软件对数据进行统计分析,采用单因素方差分析检验,若P＜0.05则认为差异有统计学意义。结果:1、NLRP1炎性小体在急性肺损伤SD大鼠中的作用:1.1百草枯组（PQ组）大鼠 0.3sFEV/FVC 显著低于 Control 组（**P＜0.01）,氢醌组（AH2QDS 组）大鼠0.3sFEV/FVC显著高于PQ模型组（##P＜0.01）。1.2.肺组织病理变化显示;正常组大鼠小气道的平滑肌及管腔的结构正常。百草枯大鼠模型组出现肺泡破坏、肺泡出血、肺间质充血水肿。气管旁炎性细胞浸润增加,肺泡扩张融合,气道肌层增厚,管壁塌陷,管腔变形和狭窄。1.3.qPCR检测结果显示:NLRP1的mRNA相对含量在百草枯组（急性损伤组）与正常对照组（Control组）相比明显升高（**p＜0.01）,氢醌组NLRP1的mRNA相对含量与急性损伤组相比明显降低（##p＜0.01）;caspase-1的mRNA相对含量在百草枯组（急性损伤组）与正常对照组（Control组）相比明显升高（**p＜0.01）,caspase-1在氢醌组的mRNA相对含量与急性损伤组相比明显降低（##p＜0.01）;百草枯组的IL-18 mRNA相对含量与正常对照组相比明显升高（**p＜0.01）,氢醌组IL-18 mRNA相对含量与急性损伤组相比明显降低（##p＜0.01）。1.4.westernblot检测结果显示:NLRP1的蛋白相对含量在各实验组与对照组相比明显升高（*p＜0.05）;AH2QDS组NLRP1的蛋白相对含量与百草枯组相比明显下降（#p＜0.05）。PQ组的IL-18蛋白相对含量与正常对照组相比明显升高（**p＜0.01）。Sivelestat组的IL-18蛋白相对含量与正常对照组相比明显升高（**p＜0.01）;AH2QDS组的IL-18蛋白相对含量与正常对照组相比明显升高（**p＜0.01）;AH2QDS组的IL-18蛋白相对含量与PQ组相比明显降低（#p＜0.05）。caspase-1在PQ组蛋白相对含量与正常对照组相比明显升高（**p＜0.01）;caspase-1在Sivelestat组蛋白相对含量与正常对照组相比明显降低（**p＜0.01）;caspase-1在AH2QDS组蛋白相对含量与正常对照组相比明显降低,（**p＜0.01）;AH2QDS组的caspase-1蛋白相对含量与PQ组相比明显降低,（##p＜0.01）。ASC在PQ组蛋白相对含量与正常对照组相比明显升高（**p＜0.01）;ASC在AH2QDS组的蛋白相对含量与对照组相比明显降低（*p＜0.05）。ASC在AH2QDS组的蛋白相对含量与百草枯组相比明显降低（#p＜0.05）。2、NLRP1炎性小体在LPS诱导肺微血管内皮细胞（HPMECs）损伤中的影响:2.1.LPS 对 HPMECs 的 IC50 为 300μg/ml。2.2.PDTC 对 HPMECs 的 IC50为130μmol/l。2.3.细胞增殖率结果显示:control+LPS+ATP组与control组相比,增殖率明显降低（**P＜0.01）;干预组与control+LPS+ATP组相比增殖率显著降低（##P＜0.01）。2.4.LPS+ATP组与Control组相比,划痕愈合率明显降低(**P＜0.01.2.5.流式细胞术检测结果显示:急性损伤组与control组相比,凋亡率明显升高（**P＜0.01）;干预组组与急性损伤组组相比,凋亡率明显降低（##P＜0.01）。2.6.细胞免疫荧光检测显示:NLRP1的绿色荧光表达（GFP）在LPS+ATP组（急性损伤组）与control组（正常对照组）相比明显升高（**P＜0.01）,干预组NLRP1的绿色荧光表达与急性损伤组相比明显降低（##p＜0.01）;急性损伤组的IL-18绿色荧光表达与control组正常对照组相比明显升高（**P＜0.01）,干预组L-18荧光表达与急性损伤组相比明显降低（##p＜0.01）。2.7.qPCR检测结果显示:NLRP1的mRNA相对含量在LPS+ATP组（急性损伤组）与control组（正常对照组）相比明显升高（**P＜0.01）;干预组NLRP1的mRNA相对含量与急性损伤组相比明显降低（##p＜0.01）;caspase-1在干预组的mRNA相对含量与急性损伤组相比明显降低（#p＜0.05）;急性损伤组的IL-18 mRNA相对含量与control组正常对照组相比明显升高（**P＜0.01）。干预组L-18 mRNA相对含量与急性损伤组相比明显降低（##p＜0.01）。2.8.用WB检测显示:NLRP1的蛋白相对含量在LPS+ATP组（急性损伤组）与control组（正常对照组）相比明显升高（**p＜0.01）;干预组NLRP1的蛋白相对含量与正常对照组相比明显降低（**p＜0.01）;急性损伤组的IL-18蛋白相对含量与control组正常对照组相比明显升高（**p＜0.01）。干预组的IL-18蛋白相对含量与正常对照组相比明显降低（**p＜0.01）;NF-κb蛋白相对含量,急性损伤组与control组正常对照组相比明显升高（**p＜0.01）。干预组的NF-κb蛋白相对含量与正常对照组相比明显降低（**p＜0.01）;PDTC对照组蛋白相对含量与正常对照组明显降低（*p＜0.05）;干预组的NF-κb蛋白相对含量与急性损伤组相比明显降低（##p＜0.01）。结论:在体内急性肺损伤模型中,可能通过TLR4/NF-κB通路激活NLRP1炎症小体,趋化炎症因子导致过度的肺部炎症,使SD大鼠肺血管内皮细胞诱发细胞焦亡,导致肺间质及肺水肿、肺出血,最终引发ARDS。在体外急性肺损伤模型中,LPS可能通过TLR4/NF-κB通路激活NLRP1炎症小体,募集caspase-1蛋白,对下游炎症因子IL-1β及IL-18剪切合成,使肺微血管内皮细胞出现收缩,细胞壁破坏,引发细胞焦亡。