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目的 结直肠肿瘤是我国最常见的恶性肿瘤之一,发病率仅次于肺癌、胃癌和肝癌。随着饮食结构和生活环境的变化,我国结直肠癌的发病率从60年代的0.06‰,猛增到90年代的0.24‰。现代科学技术的进步,不断有新的诊断和治疗手段出现,但是,结直肠癌的预后不容乐观,仍有较高复发率。随着对肿瘤基因水平的研究,目前认为结直肠癌的发生发展可能始于正常基因的损伤、癌基因的激活或者抑癌基因的失活。其中,真核生物锌指蛋白转录因子Krappel-like factor4(KLF4),通过激活或者抑制目的基因的转录来调控基因表达的时间特异性和组织特异性,在细胞生长、分化及凋亡等过程中发挥重要作用。本文主要探讨了KLF4在结直肠肿瘤中表达的变化,并分析其表达变化与临床参数间的关系。 方法 1.应用组织微阵列结合免疫组织化学S-P法,检测77例结直肠癌组织,40例癌旁组织和7例腺瘤组织中KLF4的表达及其与临床病理参数的关系。判断标准:由两位有经验的病理专家对结果进行评定。KLF4蛋白在石蜡切片中阳性表达主要定位于细胞质,呈棕黄色颗粒。根据肿瘤细胞显色的比例及染色强度,对KLF4表达做半定量判定。按阳性细胞率评分:阳性细胞数占11%~50%为2分;51%~80%为3分:>80%为4分。按显色程度评分:染色弱为1分;中等染色为2分;强染色为3分。将两种评分结合起来分4级:无论染色强度如何,细胞阳性率≤10%为阴性(-);评2或3分为弱阳性(+);评4~7分为强阳性(++~+++)。2.采用手术切除结直肠良恶性肿瘤组织,以距肿瘤10cm以上的正常黏膜作为对照,通过Western Blot方法,以β-actin为内对照,检测KLF4在新鲜结直肠肿瘤组织与正常黏膜组织中的表达,实验结果用Image-pro plus Version 5.0.1图像分析系统进行灰度值测定。3.采用SPSS10.0统计分析软件进行分析,对KLF4的表达与临床病理因素的关系采用χ~2检验,P<0.05为有统计学意义。