【摘 要】
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目的基于Cys LTs炎症通路探讨穿山龙缓解支气管哮喘模型大鼠的作用机制。方法采用雌性SD大鼠50只,按照随机分组法分为5组,分别是正常组、哮喘模型组、穿山龙组、孟鲁司特组、穿山龙合孟鲁司特组。除正常组以外,其余每组大鼠均复制成哮喘模型。制备方法分为致敏和激发两阶段;致敏阶段:实验第1天和第8天分别进行腹腔注射卵蛋白氢氧化铝溶液1 ml(包括卵蛋白10 mg及氢氧化铝200 mg);激发阶段:第1
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目的基于Cys LTs炎症通路探讨穿山龙缓解支气管哮喘模型大鼠的作用机制。方法采用雌性SD大鼠50只,按照随机分组法分为5组,分别是正常组、哮喘模型组、穿山龙组、孟鲁司特组、穿山龙合孟鲁司特组。除正常组以外,其余每组大鼠均复制成哮喘模型。制备方法分为致敏和激发两阶段;致敏阶段:实验第1天和第8天分别进行腹腔注射卵蛋白氢氧化铝溶液1 ml(包括卵蛋白10 mg及氢氧化铝200 mg);激发阶段:第15天起哮喘模型组、穿山龙组、孟鲁司特组及穿山龙合孟鲁司特组大鼠雾化吸入2%卵蛋白(OVA)激发,自然吸入30分钟,每天1次,连续20天。正常组用生理盐水代替卵蛋白氢氧化铝溶液和2%OVA进行致敏和激发。每次雾化前2 h各组大鼠给予相应的药物治疗,正常组和哮喘模型组用蒸馏水灌胃,每只大鼠灌胃1 ml,连续灌胃激发20天后进行取材。使用光学显微镜观察各组大鼠肺组织的病理情况;使用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测各组大鼠血清中的白介素-5(IL-5)和半胱氨酰白三烯(Cys LTs)水平;使用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肺组织中半胱氨酰白三烯受体1(Cys LTR1)和嗜酸性粒细胞趋化因子3(Eot-3)的m RNA表达水平。结果1.一般表现:正常组从实验第一天开始到取材前,大鼠的精神状况较其余各组大鼠要好,反应速度敏捷,呼吸平稳,摄食饮水情况良好,毛色有光泽,体重逐渐增加。模型组大鼠从第7天开始出现精神不振,第14天开始精神状态较差,反应迟钝,呼吸急促,点头挠鼻,动作迟缓,腹部痉挛,喜蜷缩在一起,站立不稳,皮毛不顺无光泽,摄食饮水量较正常组少,在造模前后大鼠的体重变化与正常组之间有显著差异(P<0.05)。各给药治疗组连续给药20天,精神逐渐转好,呼吸逐渐恢复平稳,皮毛光泽度、反应速度均较前有所改善。2.病理情况:(1)正常组:大鼠肺组织中可见气道及血管周围极少数嗜酸性粒细胞,支气管的管腔较光滑、气道黏膜未见明显水肿、上皮结构完整,肺泡之间间隔正常。(2)哮喘模型组:大鼠肺组织中可见支气管、细支气管管腔狭窄,上皮细胞增生明显,平滑肌增厚,肺间质充血水肿,气道周围血管扩张充血,血管周围组织、肺泡壁及周围可以见到炎性细胞浸润。(3)各治疗组:肺泡内仅可以见到少量的炎性细胞,部分支气管黏膜仅出现程度较轻的水肿,支气管壁及其周围炎性细胞浸润较模型组少。3.血清中IL-5、Cys LTs的检测:与正常组比较,模型组的血清中IL-5、Cys LTs水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,孟鲁司特组、穿山龙合孟鲁司特组、穿山龙组的血清中IL-5、Cys LTs水平明显降低(P<0.05);与孟鲁司特组比较,穿山龙合孟鲁司特组的血清中IL-5、Cys LTs水平明显降低(P<0.05),穿山龙组的血清中IL-5与孟鲁司特组的差异无统计学意义(P(29)0.05),孟鲁司特组的血清中Cys LTs水平比穿山龙组低(P<0.05),差异有统计学意义。4.肺组织中Cys LTR1和Eot-3的m RNA表达水平:与正常组比较,模型组大鼠肺组织中的Cys LTR1和Eot-3的m RNA水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,孟鲁司特组、穿山龙合孟鲁司特组、穿山龙组大鼠肺组织中的Cys LTR1和Eot-3的m RNA水平明显降低(P<0.05);与孟鲁司特组比较,穿山龙合孟鲁司特组肺组织中的Eot-3m RNA和Cys LTR1m RNA水平降低(P<0.05),差异有统计学意义;穿山龙组的肺组织中Cys LTR1m RNA水平显著高于孟鲁司特组(P<0.05);穿山龙组肺组织中的Eot-3m RNA水平与孟鲁司特组差异无统计学意义(P(29)0.05)。结论1.穿山龙对哮喘大鼠肺组织具有保护作用。2.穿山龙能够明显降低哮喘大鼠血清中IL-5、Cys LTs以及肺组织中的Cys LTR1和Eot-3的m RNA的表达水平,且减低IL-5和Eot-3m RNA的作用与孟鲁司特相当。3.穿山龙能够增强孟鲁司特缓解哮喘的作用,可能与抑制Cys LTs介导的炎症通路有关。
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