子宫内膜异位症（EM）是一种良性的妇科疾病，累及10%的生育期妇女，25%-35%不孕患者与此病相关。目前其病因仍不清楚,大量研究发现EM是一种多因素疾病,系统研究发现EM在位内膜在粘附、侵袭和血管形成等诸多方面有别于正常的子宫内膜，遗传因素在其发病中有重要作用，而高水平雌激素的存在是疾病存在、发展的必要因素。基质金属蛋白酶抑制剂（Tissue inhibitor ofmatrix metalloproteinases，TIMPs）是体内细胞分泌的一类蛋白酶抑制剂，它们可以与基质金属蛋白酶原（matrix metalloproteinases，MMPs）或活性酶以1:1比例结合形成复合物，从而抑制MMPs酶原激活及活性。TIMPs与MMPs协同调节局部的蛋白水解，与组织重建、胚胎植入、肿瘤的侵袭和转移密切相关。TIMP-4是基质金属蛋白酶抑制剂家族中的一员，有研究表明TIMP-4基因-930位点到-916位点这段序列与雌激素反应元件的公认序列具有很高的同源性。【目的】检测TIMP-4在子宫内膜异位症患者子宫在位及异位内膜中的表达情况，并进一步对TIMP-4的rs202071287、rs113215452基因片段的多态性进行初步研究，探讨这两个位点的SNP与子宫内膜异位症的相关性。【方法】（1）采集35名在长春市妇产医院手术治疗的子宫内膜异位症患者在位及异位内膜组织，同期住院的对照组患者30例，利用免疫组化方法检测TIMP-4蛋白在子宫内膜组织的表达情况;（2）利用微波法合成稀土上转换荧光纳米离子（UCNPs），表面修饰SiO2层，完成表面功能化并与免疫球蛋白连接，制备UCNPs标记的免疫球蛋白，通过免疫组化（SP）方法检测TIMP-4在EM患者在位内膜组织的表达;（3）对在该院手术治疗的171例子宫内膜异位症患者及对照组各抽取静脉血2毫升，提取DNA，利用限制性内切酶法检测TIMP-4的rs202071287、rs113215452基因片段的多态性。【结果】（1）TIMP-4蛋白在子宫在位及异位内膜组织中均有表达，该蛋白主要定位于子宫内膜腺上皮细胞，小血管壁也有轻度染色，基质无普遍着色。该蛋白在正常子宫内膜组织及EM患者在位内膜组织中表达强度从月经早期开始上升，月经中期达到高峰，月经晚期回落，逐渐降至最低点，表达具有时空差异。TIMP-4在EM患者在位及异位内膜表达增强，与对照组比较具有统计学意义。（2）利用稀土制备了上转换发光的荧光纳米离子NaGdF₄：Yb³⁺, Er³⁺，粒子形貌规则且粒径均一，大小约为65nm左右，在980nm激发光下，可发出肉眼可见的绿色光（550nm）.包覆了二氧化硅外壳，在硅球表面修饰氨基合成了UCNP@SiO₂-NH₂粒子，粒径增大到70nm且仍具有良好的分散性。实现氨基功能化后，将该粒子通过共价键与免疫球蛋白联接，并将修饰后的免疫球蛋白成功应用于传统的免疫组化试验中，通过抗原抗体的特异性结合，成功地检测了TIMP-4蛋白在子宫内膜腺细胞中的表达，并实现了子宫内膜细胞的靶向定位。（3）EM组与对照组TIMP-4的rs202071287和rs113215452位点的基因型频率及等位基因频率分布均未见统计学差异（P>0.05）。【结论】（1）TIMP-4主要定位于子宫内膜腺上皮细胞，小血管壁也有轻度染色，在正常子宫内膜组织和EM患者在位内膜组织中表达强度具有时空差异，在EM患者在位及异位内膜组织中表达较对照组增强，TIMP-4可能与子宫内膜异位症的发生相关。（2）制备了上转换荧光纳米粒子，通过抗原抗体的特异性结合，检测了TIMP-4蛋白在子宫内膜腺细胞中的表达，研发了一种新的荧光免疫组化方法，同时实现了子宫内膜的靶细胞定位，为EM的荧光诊断、靶向治疗奠定了前期实验基础。（3）TIMP-4基因rs202071287和rs113215452酶切位点多态性可能与EM发生无关。【创新性】（1）首次检测TIMP-4蛋白在EM患者在位及异位内膜组织中的异常表达;明确该蛋白集中在子宫内膜细胞的局限性表达。（2）制备稀土上转换纳米离子（UCNPs）并与免疫球蛋白成功连接，于传统的免疫组化技术相结合，利用抗原抗体特异性反应，检测到TIMP-4在EM患者在位内膜组织中的表达。研发了一种新的荧光免疫组化方法，同时实现子宫内膜细胞的靶向定位检测，开辟了EM的荧光诊断及靶向治疗的新领域。实现稀土纳米粒子的生物利用，为进一步的活体细胞标记及肿瘤标示动物实验奠定了前期的基础。