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MRP2是一种ATP结合盒转运蛋白,参与转运范围广泛的化合物,可以外排肺部慢性炎症因子和烟雾致炎物质,在解毒和化学保护中发挥重要作用。香烟烟雾里的尼古丁、氨、一氧化碳、氮氧化合物等可以对人的肺部造成损伤,已经证明吸烟是导致肺部慢性炎症发生的主要危险因素。FXR是一种多用途核受体,在脂蛋白和糖代谢方面以及各种呼吸系统疾病的发病机制起着重要作用。本实验通过利用香烟烟雾（CS）联合LPS的方法在SD大鼠体内建立肺部炎症模型,利用香烟烟雾提取物（CSE）、LPS以及CSE联合LPS的方法在A549细胞中建立细胞炎症模型,探究MRP2在肺部炎症状态下表达的变化以及其可能的影响机制。目的使用CS联合LPS的方法建立大鼠体内肺部炎症模型,通过单独CSE、单独LPS以及CSE联合LPS建立体外肺部炎症模型,观察相关蛋白和基因表达变化,探究转运蛋白MRP2在肺部炎症状态下表达的变化以及其可能的通路调节机制。方法1、通过CS联合LPS的方法在SD大鼠体内建立肺部炎症模型,检测MRP2和相关炎症因子的表达变化正常对照组和CS+LPS刺激组。CS+LPS刺激组通过用香烟烟雾刺激和气管内滴注LPS的方法建立,正常对照组是通过放置在新鲜空气中和气管内滴注生理盐的方法建立。造模结束后通过观察大鼠的体表特征,以及病理分析肺部状态,考察MRP2以及相关炎症因子的表达。2、通过单独CSE、单独LPS以及CSE+LPS的方法在A549细胞中建立体外炎症模型,检测MRP2和相关炎症因子的表达变化正常对照组、单独CSE组、单独LPS组和CSE+LPS组。作用24小时后,考察MRP2和相关炎症因子的表达。3、通过CSE+LPS在A549细胞中建立体外细胞炎症模型,对FXR进行沉默或过表达操作,检测MRP2、FXR以及相关炎症因子的表达变化正常对照组、模型组、模型组+阴性对照组、模型+沉默FXR组或模型+过表达FXR组。考察MRP2、FXR和相关炎症因子的表达。结果1、体内实验结果表明大鼠模型组与对照组相比,模型组大鼠随着造模时间的增加逐渐出现疲倦现象,呼吸越发急促并伴有咳嗽,通过对肺组织病理学观察可发现随着造模时间的增加肺泡破裂程度逐渐增大、支气管逐渐变窄、气管壁逐渐变厚,免疫组化结果分析显示中性粒细胞以及巨噬细胞的数量逐渐增多,MRP2的数量逐渐减少,通过对组织蛋白和基因分析发现MPP2随着造模时间的增加表达逐渐下调,相反,相关炎症因子表达逐渐上调。2、细胞实验结果表明与正常对照组相比,单独CSE组和CSE+LPS组,MRP2的表达下降,IL-6和TNF-α表达上调;单独LPS组,MRP2的表达不变,IL-6和TNF-α表达上调。3、细胞机制实验结果表明与正常对照组对比,CSE+LPS模型组中MRP2和FXR表达下降,IL-6和TNF-α表达上升;与CSE+LPS模型组比较,CSE+LPS+沉默FXR组MRP2和FXR表达下调,而IL-6和TNF-α的表达上调,CSE+LPS+过表达FXR组MRP2和FXR表达上调,而IL-6和TNF-α的表达下调。结论1、在大鼠体内,CS联合LPS诱导的肺部慢性炎症模型,MRP2的表达随着造模时间的增加逐渐下调。2、在A549细胞中,单独CSE和CSE+LPS诱导的肺部炎症模型,MRP2的表达下调,单独LPS单独CSE诱导的肺部炎症模型,MRP2的表达不变。3、沉默FXR可以下调MRP2的表达,过表达FXR可以上调MRP2的表达。MRP2的表达变化可能与FXR信号通路有关。