【摘 要】
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目的研究天蚕素A-马盖宁杂合肽对小鼠小肠黏膜免疫功能的影响并探讨其作用机制。方法表达天蚕素A-马盖宁杂合肽混合检测蛋白质浓度;取18只SPF级雌性、6周龄、体重相近的BALB/
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目的研究天蚕素A-马盖宁杂合肽对小鼠小肠黏膜免疫功能的影响并探讨其作用机制。方法表达天蚕素A-马盖宁杂合肽混合检测蛋白质浓度;取18只SPF级雌性、6周龄、体重相近的BALB/c小鼠随机分组:空白组(0.9%生理盐水0.75m L)、低剂量杂合肽组(1/2原液蛋白质浓度杂合肽0.75m L)、高剂量杂合肽组(原液蛋白质浓度杂合肽0.75m L)灌胃六周。于灌胃开始前后记录空腹体重并计算平均日增重;HE染色观察小肠黏膜形态;平板计数测定盲肠内容物肠道菌群;Brd U掺入法检测Peyer’s patches处T、B淋巴细胞的增殖能力;免疫组化测定小肠黏膜内Ig A的阳性表达量;ELISA测定小肠组织匀浆液中IL-2、IFN-γ和IL-4的含量以及IFN–γ/IL-4;Real-time PCR检测小肠组织NF-КB m RNA水平及ELISA测定小肠组织匀浆液内NF-КB蛋白的表达量。结果天蚕素A-马盖宁杂合肽有明显抑菌活性,混合后蛋白质浓度为0.52 mg/m L;灌胃6周后,杂合肽组小鼠体重显著大于空白组(P<0.05);十二指肠绒毛长度显著大于空白组(P<0.05);各段小肠隐窝深度均明显低于空白组(P<0.05)且V/C均明显高于空白组(P<0.05);杂合肽组盲肠内容物中大肠杆菌数量显著低于空白组(P<0.05),双歧杆菌与乳酸杆菌数量显著高于空白组(P<0.05)且有剂量依赖性;杂合肽组小肠集合淋巴结内CD3+T细胞中CD3+Brd U+细胞百分率及B220+B细胞中B220+Brd U+细胞百分率均显著高于空白组(P<0.05);杂合肽组小肠黏膜内Ig A及IL-2、IFN-γ和IL-4的阳性表达水平均显著升高(P<0.05),IFN-γ/IL-4差异不显著(P<0.05);小肠组织中NF-КB m RNA水平及蛋白表达量均显著高于空白组(P<0.05)。结论天蚕素A-马盖宁杂合肽杂合肽灌胃6周后可提高小鼠的体重及小肠黏膜免疫水平。机制是有效改善小肠黏膜结构促进营养物质的消化吸收;显著降低肠道有害菌群的数量并促进有益菌群生长以增强肠道生物屏障功能;促进NF-КB的释放,进一步诱导小肠集合淋巴结内淋巴细胞的增殖及Ig A的分泌,促进细胞因子IL-2,IFN–γ,IL-4的分泌并维持Th1/Th2的平衡,提高小肠细胞免疫和体液免疫水平。
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