白英化学成分研究及其抗肿瘤活性筛选

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白英为茄科植物白英Solanum lyratum Thunb.的干燥全草,始载于《神农本草经》,为上品药物,其味苦、辛,性微寒,归肝、胆经,具有清热解毒、祛风利湿的功效,临床多应用于防治肺癌、膀胱癌、子宫颈癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌等多种癌症,此外还用于治疗疟疾、黄疸、淋病、风湿关节痛等。白英中已报道成分主要为甾体类成分,包括甾体皂苷和甾体生物碱两类。此外,白英中还含有黄酮类、多酚类、有机酸类、倍半萜类、甾醇类、香豆素类等其他类成分。为深入挖掘白英中的抗肿瘤活性成分,本研究对白英开展了系统的化学成分研究。综合运用各种柱层析色谱(硅胶柱色谱、凝胶柱色谱等)、制备薄层色谱及高效液相色谱等分离手段,从白英80%乙醇提取物中共分离得到20个化合物,并通过理化性质分析、波谱学测试以及与文献数据比对等方法鉴定了其中16个化合物的化学结构,包括6个木脂素类化合物、4个酰胺类化合物、3个黄酮类化合物、2个倍半萜类化合物和1个其他类化合物,分别为松脂素-O-β-D-葡萄糖苷(SL-1)、芦丁(SL-2)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(SL-3)、(1’R,2R,5S,10R)-2-(1’,2’-dihydroxy-1’-methylethyl)-6,10-dimethylspiro[4,5]dec-6-en-8-one(SL-4)、(7’R)-N-feruloyl normetanephrine(SL-5)、1R-(3-ethylphenyl)ethane-1,2-diol(SL-6)、(7S,8R,8’R)-5,5’-dimethoxylariciresinol(SL-7)、(E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-N-(2-(4-hydroxyphenyl)-2-methoxyethyl)acrylamide(SL-8)、N-反式-阿魏奥克巴胺(SL-9)、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷(SL-10)、(E)-N-(2-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl)-3-(4-hydroxyphenyl)acrylamide(SL-11)、(1’S,2R,5S,10R)-2-(1’,2’-dihydroxy-1’-methylethyl)-6,10-dimethylspiro[4,5]dec-6-en-8-one(SL-12)、alangilignoside B(SL-13)、松脂素(SL-14)、officinalioside(SL-15)、isolariciresinol-9-acetate(SL-16)。经Scifinder等数据库系统检索,其中SL-16为1个未见文献报道的新化合物,SL-11为1个未见文献报道的新天然产物,另外,SL-13、SL-15为首次从白英植物中分离得到的化合物。MTT法对化合物SL-2~SL-15进行抑制人类肝癌Hep G2细胞活性的筛选。筛选结果提示,所检测的化合物一定浓度条件下均能不同程度显著抑制Hep G2肿瘤细胞的生长,其中化合物(E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-N-(2-(4-hydroxyphenyl)-2-methoxyethyl)acrylamide(SL-8)100μmol/L浓度条件下活性最强。采用核磁共振波谱技术和液质联用技术对白英提取物及其正丁醇萃取部位进行了定性分析研究,结合文献报道的相关数据与质谱裂解规律、搜索chemspider、pubchem等数据库,对白英正丁醇部位中的TOF-MS结果进行解析,从中共鉴定出20个化学成分,包括11个甾体生物碱类、5个酰胺类、2个倍半萜类、1个木脂素类和1个黄酮类成分,对比系统化学成分分离所得到的对照品的保留时间与质谱裂解方式,确证了其中7个化合物,为阐明白英正丁醇部位药效物质基础提供了依据。
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