【摘 要】
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目的:观察脓毒症急性肺损伤时缝隙连接蛋白43（connexin 43,Cx43）与肺泡Ⅱ型上皮细胞屏障功能通透性的关系以及验证Cx43如何通过PKA信号通路调节脓毒症急性肺损伤。方法:细胞水平:分为四组分别是对照组、脓毒症（LPS）组、LPS+PKA抑制剂（H89）组、PKA激活剂（8-Bromo-c AMP）组。首先应用Western bloting检测A549细胞p-Ser373、PKA,p-
【基金项目】
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山西省太原市科技项目（编号:12016905）,项目来源:山西省太原市科技项目,始于2012年12月；
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目的:观察脓毒症急性肺损伤时缝隙连接蛋白43（connexin 43,Cx43）与肺泡Ⅱ型上皮细胞屏障功能通透性的关系以及验证Cx43如何通过PKA信号通路调节脓毒症急性肺损伤。方法:细胞水平:分为四组分别是对照组、脓毒症（LPS）组、LPS+PKA抑制剂（H89）组、PKA激活剂（8-Bromo-c AMP）组。首先应用Western bloting检测A549细胞p-Ser373、PKA,p-PKA的表达含量。其次用transwell板上培养A549细胞,待培养成单层细胞后,再次分成上面四组,在每个组中再次加入相同浓度的药物,最后通过FITC标记的葡聚糖,并用酶标仪通过FITC通道读取荧光值来说明A549单层细胞的通透性。结果:与对照组相比,脓毒症组的p-Ser373、PKA,p-PKA的表达含量明显增高（P<0.05）,脓毒症组A549细胞通透性增高（P<0.05）;与脓毒症组相比,LPS+PKA抑制剂（H89）组的p-Ser373表达量降低（P<0.05）,p-PKA表达量增高（P<0.05）,PKA表达量降低（P<0.05）,A549细胞通透性明显降低（P<0.05）;与脓毒症组相比,PKA激活剂（8-Bromo-c AMP）组的p-Ser373表达量降低（P<0.05）,p-PKA表达量降低（P<0.05）,PKA表达量显著增高（P<0.05）,A549细胞通透性显著增大（P<0.05）。结论:脓毒症所致的急性肺损伤在肺泡Ⅱ型上皮细胞表达的p-Ser373、PKA,p-PKA的表达含量明显增加,肺泡上皮屏障通透性增加,加入PKA抑制剂（H89）可以降低Cx43的磷酸化水平,同时降低脓毒症对肺泡上皮屏障的破坏作用,也证明了脓毒症急性肺损伤可通过PKA途径诱导p-Ser373的表达,进一步完善了脓毒症急性肺损伤的发生机制。
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