实验目的：　　通过建立香烟烟雾提取物(CSE)损伤气道上皮的体外模型,观察在气道上皮损伤修复过程中p120以及NF-κB信号通路相关蛋白的表达变化,从而对气道炎症发生过程中的相关机制进行初步探讨。　　实验方法：　　使用不同浓度的香烟烟雾提取物(CSE)刺激培养的人气道上皮细胞(HBE)建立体外气道上皮损伤模型;采用CCK-8试剂盒检测CSE的毒性对培养细胞增殖活性的影响;倒置相差显微镜下观察 CSE对培养细胞形态的影响;Western blot法检测CSE刺激后培养细胞内p120、NF-κB p65、IκBα及p-IκBα等蛋白表达量的变化。　　实验结果：　　1.CSE刺激对培养细胞的活力影响　　本实验选用了5个实验浓度,分别为1％、5％、10％、15％、30％。每组做6个复孔,重复三次。实验结果表明:较低浓度的香烟烟雾提取物(1％)对细胞活性影响不明显,但随着香烟烟雾提取物浓度增高至5％,培养细胞的增殖活性即开始降低,至15％时,培养细胞的增殖活力明显降低。　　2.CSE刺激引起的培养细胞形态学改变　　对照组培养的HBE细胞立体感强,细胞间连接紧密,呈典型的上皮细胞铺路石样形态。香烟烟雾提取物处理组HBE细胞变得较为伸展和扁平,立体感减弱,细胞间隙增宽。当增加香烟烟雾提取物浓度时,培养细胞的这种变化更为明显。而更高浓度(CSE浓度30％)时,大部分培养细胞胞体皱缩、变圆,细胞间连接丧失,死细胞增多。　　3.CSE刺激引起培养细胞内多种蛋白的表达变化　　(1)在正常培养的人气道上皮细胞中p120表达丰富,经不同浓度的香烟烟雾提取物(1％、3％、5％、10％、15％)刺激后,培养细胞p120表达呈现减少趋势,且具有浓度依赖性。　　(2)不同浓度的香烟烟雾提取物(1％、3％、5％、10％、15％)的刺激均可引起人气道上皮细胞内NF-κB p65总蛋白的表达增加,具有浓度依赖性。　　(3)不同浓度的香烟烟雾提取物(1％、3％、5％、10％、15％)刺激后IκBα表达降低而磷酸化的IκBα表达增加,具有浓度依赖性。　　实验结论：　　香烟烟雾提取物可以通过下调气道上皮细胞p120表达引起IκBα发生磷酸化并降解,从而活化NF-κBp65引起气道炎症反应。