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目的: 研究胆管癌细胞株、患者组织和血清中结肠癌转移相关基因-1(MACC1)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白的表达,探讨MACC1和hTERT在胆管癌中的表达及其临床意义。 方法: 1.体外培养人胆管癌细胞株QBC939和人正常肝内胆管上皮细胞HIBEC,采用免疫印迹(Western blotting)法检测其MACC1和hTERT蛋白的表达。 2.收集2015年7月至2016年7月湖南省人民医院肝胆外科60例胆管癌、30例胆道良性病变患者术前血清和术后病理组织标本及30例体检健康者血清标本,采用免疫组化染色技术检测组织中MACC1和hTERT蛋白的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清MACC1和hTERT蛋白的表达,并结合临床病理资料进行统计学分析。 结果: 1.胆管癌细胞株QBC939中MACC1和hTERT蛋白表达水平明显高于人正常肝内胆管上皮细胞HIBEC。 2.MACC1和hTERT蛋白在胆道疾病患者组织中的表达: (1) MACC1和hTERT蛋白在胆管癌患者组织中的表达均显著高于胆道良性病变组(P<0.01)。 (2)胆管癌患者组织中MACC1、hTERT的表达与肿瘤组织分化程度、是否发生淋巴结转移和患者临床TNM分期有关(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤大小均无明显关系(P>0.05)。 (3)胆管癌患者组织中MACC1与hTERT的表达呈正相关,相关系数r=0.699,P<0.01。 3.MACC1和hTERT蛋白在胆道疾病患者及健康对照组血清中的表达: (1) MACC1蛋白在胆管癌组、胆道良性病变组和健康对照组血清中的含量分别为:6.05(4.65,9.07)、3.11(2.26,3.53)和2.31(1.83,2.82)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.01)。组间两两比较,MACC1在胆管癌中的表达水平明显高于胆道良性病变组及健康对照组(P<0.01),在胆道良性病变组的表达明显高于健康对照组(P<0.05);hTERT蛋白在胆管癌组、胆道良性病变组和健康对照组血清中的含量分别为:88.95(48.00,129.22)、25.95(17.46,43.27)和23.88(15.22,30.44) ng/mL,差异有统计学意义(P<0.01)。组间两两比较,hTERT在胆管癌中的表达明显高于胆道良性病变组和健康对照组(P<0.01),胆道良性病变组与健康对照组的hTERT表达无统计学差异(P>0.05)。 (2)血清MACC1、hTERT蛋白的表达与胆管癌患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度均无明显差异(P>0.05),而与肿瘤是否发生淋巴结转移和患者临床TNM分期有关(P<0.05)。 (3) MACC1在组织和血清中表达呈正相关,相关系数r=0.565,P<0.01;hTERT在组织和血清中表达呈正相关,相关系数r=0.593,P<0.01。 (4)血清中MACC1和hTERT单独和联合检测的ROC曲线下面积(AUCROC)分别为0.896、0.909、0.916,两者联合检测的敏感性最高(91.7%),MACC1单独检测的特异性最高(90.0%)。 结论: 1.MACC1和hTERT蛋白在胆管癌细胞株QBC939中高于人肝内胆管上皮细胞HIBEC的表达。 2.MACC1和hTERT在胆管癌患者组织和血清中呈高表达,显著高于胆道良性变病组织。发生淋巴结转移、临床TNM分期越晚的患者组织和血清中MACC1、hTERT表达越高。MACC1和hTERT在患者组织和血清中的表达均呈现良好的正相关性。 3.血清中两者联合检测可以提高诊断的灵敏度,较好地鉴别胆道恶性肿瘤与良性病变,为胆管癌患者的临床诊疗提供依据。