帕金森症(PD)是一种神经退行性疾病,其病理特征是黑质致密部多巴胺能神经元的逐渐丧失和路易氏病理学。路易氏病理学指的是α-synuclein的异常聚集,在PD病理生理学方面扮演着关键角色。帕金森症发病机制的复杂性给临床治疗带来了巨大挑战,目前的临床药物还不能阻止或延缓神经退行性病的进程,因此,寻求新的治疗方法及治疗药物已迫在眉睫。据报道姜黄素、海藻糖等天然化合物对于突触核蛋白有抑制作用,然而治疗效果并不明显。白藜芦醇(RV)作为一种具有多种生物活性的多酚类化合物,具有多种生物学功能如心脏保护、抗炎和抗氧化等。新近研究显示,白藜芦醇还能预防多种神经退行性疾病及其相关并发症。但是,就白藜芦醇对帕金森症的治疗和预防效果及其机制尚未完全阐明。基于以上研究背景,本试验分别通过体外、体内试验检测白藜芦醇对于α-synclein的影响。在体外试验中,采用硫磺素荧光(ThT)、透射电子显微镜观察白藜芦醇对于α-synclein聚集的影响,进一步采用细胞活性实验检测白藜芦醇对于神经细胞的影响。在体内试验中,通过动物行为学研究白藜芦醇对动物行为协调能力以及认知水平的调控作用:运用Western blot、Dotblot的手段检测白藜芦醇对于转基因小鼠脑内总α-synclein和α-synclein寡聚体水平,并且通过免疫组织化学检测与PD相关的病理生化变化;利用免疫组织化学、ELISA的方法验证白藜芦醇对炎症水平和氧化应激水平的影响,从而揭示白藜芦醇治疗帕金森症的机制。研究结果如下:(1)通过对α-synuc 1 ein寡聚体的构象和分子水平检测发现,低浓度和高浓度的白藜芦醇对于α-synuclein寡聚体都有抑制作用,且高浓度白藜芦醇浓度抑制寡聚体的聚集效果更加明显。细胞水平显示,α-synuclein对于神经细胞有毒性作用,而高剂量的白藜芦醇显著增强了细胞活性;(2)通过旷场实验、爬竿实验、抱爪实验等动物实验研究发现,白藜芦醇处理的A53T转基因小鼠运动障碍得到明显改善;并且在新事物认知实验、Y迷宫实验也证实转基因小鼠的认知障碍得到有效缓解;(3)通过Western blot、Dot blot试验发现,白藜芦醇可以降低A53T转基因小鼠脑内α-synuclein水平,也通过免疫组织化学手段验证了磷酸化的-αsynuclein减少,而络氨酸羟化酶明显增多;(4)通过EIISA、免疫组织化学结果显示,白藜芦醇抑制了星形胶质、小胶质细胞的激活,降低了小鼠相关炎性因子及活性氧水平,从而抑制了转基因小鼠的炎症反应,降低了氧化应激水平。综合以上研究结果,阐明了白藜芦醇治疗帕金森症的作用为:白藜芦醇有效的降低了 α-synuclein的聚集并且缓解了 α-synuclein聚集引发的神经细胞死亡,提高了细胞存活率;动物行为学研究中显示,白藜芦醇改善了转基因小鼠的运动障碍和认知缺陷;同时,白藜芦醇有效降低了总α-synuclein与寡聚体的水平以及改变了 PD相关病理生化指标;并且有效降低了转基因小鼠的炎症反应及氧化应激反应。