目的:染色体畸变(chromosomal aberration)分为染色体数目畸变和染色体结构畸变,可导致男性不育和新生儿出生缺陷以及自然流产。Y染色体微缺失(Azoospermia factor,AZF)和克氏综合征(47,XXY)是造成男性不育的常见遗传因素;唐氏综合征(21-三体)和特纳综合征(45,X)是导致自然流产或出生缺陷的常见原因。第一部分,系统全面的阐述AZF和染色体数目畸变的研究现状,介绍了传统的AZF和染色体数目畸变诊断方法以及新兴的分子生物学诊断方法,从而为染色体畸变的快速检测研究奠定良好的理论基础。第二部分,为解决传统检测技术的缺陷,对男科门诊收集的40例AZF和20例47,XXY样本,建立一种可快速同时检测两种疾病的四重实验体系,为男性不育遗传学检测提供重要的工具。第三部分,研究分析高分辨熔解曲线(High Resolution Melting Analysis,HRM)技术对新生儿时期78例脐带血和20例干血片样本中47,XXY疾病的快速诊断,评估该技术在临床上的应用。第四部分,研究分析HRM技术对羊水细胞中3例21-三体和3例45,X样本快速检测的应用评估。方法:第一部分研究,从Pubmed数据库搜索、查询并整理AZF和染色体数目畸变的文献,综述研究现状及诊断方法。第二部分研究,建立一种以qPCR与HRM技术为基础的四重实验体系并加以优化,对40例AZF和20例47,XXY男性不育患者样本进行快速同时检测,通过分析和诊断的灵敏度和特异性,评估该方法的有效性。第三部分研究,利用HRM技术对新生儿时期78例脐带血样本和20例干血片样本中的47,XXY进行快速诊断,评估该方法的有效性。对新生儿干血片样本进行三种DNA提取方法的比较。第四部分研究,利用HRM技术对羊水细胞中3例21-三体和3例45,X样本进行快速检测,评估该方法的有效性。结果:首先,传统AZF的检测多用凝胶电泳方法,但效率低、操作繁琐、易污染;染色体数目畸变的金标准检测方法是核型分析,但其检测时间较长(7-14天)且需要专业人员进行操作,临床应用受限。比较了目前各种诊断技术的优缺点之后。在qPCR和HRM的基础上,提出一种新的诊断AZF和染色体数目畸变技术的构想。其次,四重qPCR和HRM体系对40例AZF和20例47,XXY男性不育患者的检测,结果显示出100%的诊断灵敏度和特异性。该实验DNA模板量的检测下限为2.5 ng。再次,HRM技术在78例脐带血样本和20例干血片样本中成功筛选并区分出正常男性和正常女性的样本。遗憾的是因样本收集有限,未能在这些样本中检测到47,XXY。干血片样本三种DNA提取方法的比较,结果显示用标准商业试剂盒和水煮方法提取的DNA,检测结果没有明显差异。最后,利用HRM技术在3例21-三体羊水细胞样本中成功检测,而在3例45,X样本中仅成功检测2例,1例嵌合体未区分成功。结论:本研究在qPCR和HRM技术的基础上,提出并建立了一种能快速同时筛查AZF和47,XXY的实验技术,并利用HRM初步完成了在男性不育、新生儿异常以及羊水细胞检测三个临床领域的应用评估。结果显示该技术具有操作简单、检测快速、结果准确、通量高等优点。为AZF以及染色体数目畸变快速诊断领域提供了有力的工具。