鸡FATP1/FATP4基因的克隆、表达及其与屠体性状的关联分析

被引量 : 10次 | 上传用户:ApexLiuNck
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
长链脂肪酸如同信号分子一样,也是重要的代谢产物。研究发现在长链脂肪酸摄取中一些候选蛋白如脂肪酸易位酶(FAT/CD36),脂肪酸合成蛋白(FABP),长链脂肪酰基辅酶A合成酶(ACSL)和脂肪酸转运蛋白(FATP)对长链脂肪酸的摄取和代谢具有重要作用,但都不如FATP对脂质代谢和脂肪相关疾病的影响,为此,当前对FATP基因家族的研究也逐渐成为了热点。本研究以四川山地乌骨鸡为试验材料,通过生物信息学分析,获取四川山地乌骨鸡FATP4蛋白的部分序列,以pMD-18T为载体,在DH5α菌株中进行FATP4蛋白CDS区的分子克隆,并对其质粒进行了序列测定。运用蛋白质组学分析工具,对CDS区的基本性质、糖基化位点、磷酸化位点、二级结构等进行了预测,确定该序列具有FATP家族的结构特点,是鸡FATP家族成员蛋白。本研究以地方品种四川山地乌骨鸡和培育优质鸡“大恒”S01系为试验材料,采用SYBR greenⅠ定量PCR分析FATP1基因和FATP4基因在10周龄这个时间点两品种间的表达差异,同时分析了四川山地乌骨鸡0周龄,2周龄,4周龄,6周龄,8周龄,10周龄和12周龄等这7个时间点FATP1和FATP4基因表达的组织差异,以及在胸肌,腿肌,心脏,肝脏等组织中FATP1和FATP4基因表达量的发育性变化。结果表明:FATP1和FATP4在两个品种间的表达差异不显著(P>0.05)。FATP1和FATP4在不同阶段各有优势表达组织,同一组织中也有表达的优势时间点。本研究运用PCR-SSCP及测序技术检测突变位点。根据FATP1基因组序列共设计10对引物,在8个大恒优质肉鸡群体中,只有4对引物检测到多态,共检测到5处突变,分别为49360bp(SNP1,G/A),48195 bp(SNP2,G/A),46847bp(SNP3,A/G),46818bp(SNP4,A/G)和46555bp(SNP5,A/G)。检测到的突变分别位于外显子3、内含子5、内含子7、内含子7和外显子8内。由于SNP4变异位点的个体数少,为此我们没有对该位点进行后续的分析。FATP1基因突变位点与屠宰性状关联分析结果显示:SNP1位点:在70d鸡群中,GG型个体的胸肌重,腿肌重和胸肌率均显著高于AA和AG型个体(P<0.05);在91d鸡群中,AG型个体的活重,屠体重,半净膛重,全净膛重,腿肌重和腿肌率显著高于GG型个体(P<0.05);在所有鸡群中,AA基因型个体的活重,屠体重,半净膛重和全净膛重显著高于AG和GG型个体(P<0.05),GG型个体的胸肌率显著高于AA和AG型个体(P<0.05)。SNP2位点:在70d鸡群中,NN型个体的胸肌重,腿肌重,胸肌率和腿肌率显著高于MM和MN型个体(P<0.05);在91d鸡群中,NN型个体的活重,屠体重,半净膛重和全净膛重显著高于MM和MN型个体(P<0.05),而MN型个体的皮脂厚和腹脂率显著高于NN型个体(P<0.05);在所有鸡群中,NN型个体的活重,屠体重,半净膛重,全净膛重,腿肌重,胸肌率和腿肌率显著高于MM和MN型个体(P<0.05)。SNP3位点:在70d和91d鸡群中,3种基因型个体与所有屠体性状之间都没有显著差异(P>0.05);在所有鸡群中,AA型个体的活重和屠体重显著高于AG型个体(P<0.05)。SNP5位点:在70d鸡群中,MN型个体的活重,屠体重和全净膛重显著高于MM型个体(P<0.05),而NN型个体的腿肌率显著高于MN型个体(P<0.05);在91d鸡群中,NN型个体的活重,屠体重,半净膛重,全净膛重和腿肌率显著高于MM和MN型个体(P<0.05),同时MN型个体的胸肌率显著高于NN型个体(P<0.05);在所有鸡群中,NN型个体的腿肌率显著高于MN和NN型个体(P<0.05)。单倍型与8个群体的屠宰性状关联分析结果显示:在70d鸡群中,单倍型组合对活重,屠体重,全净膛重,胸肌重,腿肌重,皮脂厚,胸肌率和腿肌率的遗传效应达到显著水平(P<0.05);在91d鸡群中,单倍型组合对活重,屠体重,全净膛重,半净膛重,皮脂厚,腿肌率和腹脂率的遗传效应达到显著水平(P<0.05);在所有鸡群中,单倍型组合对活重,屠体重,全净膛重,半净膛重,皮脂厚,腿肌率和胸肌率的遗传效应达到显著水平(P<0.05)。同样运用PCR-SSCP及测序技术检测突变位点,根据FATP4基因组序列共设计15对引物,在8个鸡群中,有6对引物检测到多态,共检测到8处突变,分别为5108778bp(G/A),5108695(G/A),5108287(C/-),5107545(T/C),5106740(C/T),5106005(A/G),5105481(G/A)和5105454(C/T)。在FATP4基因的8个突变中,等位基因A、C、C和A依次为SNP2,SNP3,SNP5和SNP7的优势等位基因。FATP4基因单突变位点与屠体性状关联分析结果显示,SNP1位点(G5108778A):在70d鸡群中,3种不同基因型与胸肌率和腿肌率显著相关(P<0.05);在90d鸡群中,SNP1对胸肌率和腹脂率的遗传效应达到显著水平(P<0.05);在所有鸡群中,3种基因型与活重,屠体重,半净膛重,全净膛重,腹脂重,胸肌率,腿肌率和皮脂厚显著相关(P<0.05)。SNP2位点(G5108695A):在70d和91d鸡群中,3种基因型与所有屠体性状都没有达到显著相关水平(P>0.05),在所有鸡群中,GG型个体的腹脂重和皮脂厚显著高于AG型个体(P<0.05)。SNP3位点(C5108287-):在70d鸡群中,SNP3对腹脂重,腿肌率和腹脂率的遗传效应达到显著水平(P<0.05);在91d鸡群中,TT型个体的胸肌率显著高于CT型个体(P<0.05);在所有鸡群中,TT型个体的腹脂重,胸肌率,腿肌率和腹脂率显著高于CT和CC型个体(P<0.05)。SNP4位点(T5107545C):在70d鸡群中,TT型个体的胸肌重,腿肌重和腿肌率显著高于CC型个体(P<0.05),而TC型个体的皮脂厚显著高于CC型个体(P<0.05);在91d鸡群中,TT型个体的屠体重,活重,半净膛重和全净膛重显著高于CC型个体(P<0.05);在所有鸡群中,TC型个体的活重,活重和全净膛重显著高于TT型个体,而TT型个体的腿肌率显著高于CC型个体(P<0.05)。SNP5位点(C5107640T):在70d鸡群中,不同基因型只与胸肌率显著相关(P<0.05);在所有鸡群中,SNP5对应的不同基因型间的皮脂厚性状差异显著(P<0.05)。SNP6位点(A5106005G):在70d鸡群中,AG型个体的胸肌重和胸肌率显著高于AA和GG型个体(P<0.05);在91d和所有鸡群中,GG型个体的活重,屠体重,半净膛重,全净膛重和腿肌重显著高于AA型个体(P<0.05)。SNP7位点(G5105481A):在70d和90d鸡群中,GG型个体的活重和全净膛重显著高于AG型个体(P<0.05);在所有鸡群中,AG型个体的胸肌率显著高于AA型个体(P<0.05)。SNP8位点(C5105454T):在3个鸡群中不同基因型个体的所有屠宰性状之间差异不显著(P>0.05)。单倍型与8个群体的屠宰性状关联分析结果显示:在70d鸡群中,单倍型组合对活重,屠体重,全净膛重,胸肌重,腿肌重,腹脂率,胸肌率和腿肌率的遗传效应达到显著水平(P<0.05);在91d鸡群中,单倍型组合对活重,屠体重,全净膛重,半净膛重,腹脂重,皮脂厚,胸肌率,腿肌率和腹脂率的遗传效应达到显著水平(P<0.05);在所有鸡群中,单倍型组合对活重,屠体重,全净膛重,半净膛重,腹脂重,腿肌重,皮脂厚,胸肌率,腿肌率和腹脂率的遗传效应达到显著水平(P<0.05)。
其他文献
民以食为天,民食安全关系国计民生,是古今中外都必须关注和解决的问题。当代中国是一个有13亿人的人口大国,其民食安全状况在整个世界粮食安全系统中具有举足轻重的位置。人
随着我国高等教育体制改革的深化和高等教育大众化进程的加快,高校毕业生数量迅速增加,大学生就业问题越来越突出,就业难已成为社会的共识。在此背景下,研究和探讨高校就业指
橡胶集料混凝土(简称CRC)作为一种新型混凝土材料,具有低弹性模量、大变形、高阻尼、能量耗散多及良好的抗裂性等特点,是混凝土材料发展的热点方向之一。本文以C40为基准混凝
本文旨在探究元认知策略培训与口语流利度、复杂度及准确度之间的关系。主要回答以下四个研究问题:(1)元认知策略培训能否提高中学生元认知策略和口语学习策略的运用意识?(2)
金融时间序列的特点:(1)产生过程的随机性、复杂性;(2)多数含有噪声;(3)数据间具有较强的非线性。近年来,人们将神经网络、混沌理论、遗传算法以及系统理论和当代应用数学研
有限责任公司的股权转让要有效避免纠纷产生或解决纠纷,应该遵循以下原则运作:以法律强制性规则为出发点、以公司章程为基础、以股东协议为补充、以裁判机关的裁量为最终路径
与其他语言教材相比,英语报刊以“内容新颖、语言现代、知识丰富、词语实用”的独特优势,正成为一种新型的英语教学资源引入高中课堂,丰富和提升教师的教学手段,拓宽学生接触、运
二战以来 ,随着经济全球化进程的加快和生产力发展 ,西方国家在生产关系和经济结构上有了深刻调整 ,西方工人阶级队伍的阶级结构也随之发生了新变化 ,其主体的知识化、脑力化
进入21世纪以来,在能源开发、石油化工、航空航天等工业技术的飞速发展极大推动社会进步的同时,也给人类的安全生产和生态环境带来了隐患。随着人们环保意识的逐渐增强,对易