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外周血单个核细胞包含了机体免疫系统最重要的两类细胞，即单核细胞和淋巴细胞。由单核细胞构成的单核吞噬系统不仅是机体固有免疫的重要组分；而且能够呈递抗原激活淋巴细胞引发获得性免疫。获得性免疫主要由淋巴细胞介导，发生体液免疫和细胞免疫应答。为了研究牛单个核细胞的分化、免疫特性、及对奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎炎症反应，本研究以9头健康的中国荷斯坦奶牛为研究对象，研究了牛单核细胞分化，淋巴细胞功能及单核巨噬细胞和CD8T细胞对金黄色葡萄球菌的免疫反应，并且利用荧光定量PCR法，研究了牛外周血单个核细胞对金黄色葡萄球菌性乳房炎急性期的炎症反应。得到了如下主要结果：1利用磁珠分选技术，成功从牛外周血单个细胞中分离得到了纯度为90%的单核细胞。在无细胞因子的刺激下，经体外培养7d，获得单核分化的巨噬细胞。经流式细胞仪检测，巨噬细胞表面抗原标记TLR2和CD172a较单核细胞增多。2从牛外周血单核细胞中克隆转录因子PU.1，构建了牛PU.1真核表达载体，在脂质体的介导下，转染H293T和牛胎儿成纤维细胞，转染后的24h和48h,成功用Western-blot检测到牛PU.1蛋白。3用PMA和PHA分别刺激牛外周血单个核细胞，48h后发现CD8T细胞出现了增殖，利用ELISA方法检测到了牛INF-γ的合成，且INF-γ的诱生存在个体差异。4将牛单核巨噬细胞用灭活的金黄色葡萄球菌侵染后发现，巨噬细胞的形态发生明显变化，且表面抗原标记TLR2和CD172a的表达都有所增加。当用活菌侵染48h后，没有发现巨噬细胞内存在活的金黄色葡萄球菌。通过用灭活的金黄色葡萄球菌侵染牛外周血单个核细胞，经PMA激活后发现CD8T细胞胞内INF-γ有明显的提高。5构建了金黄色葡萄球菌侵染奶牛乳腺的疾病模型，利用荧光定量PCR方法，监测了在奶牛乳房炎的急性期，牛外周血单个核细胞IL-8、CD14、M-CSFR、TLR2、CCR2和CX3CR1在不同时间点的表达。结果发现IL-8在牛传染后的1d和2d出现了显著的上调，CD14和CCR2均在1d出现上调，M-CSFR、TLR2和CX3CR1的表达没有发生显著的变化。另外也检测了牛乳中体细胞数（SCC）和血浆中LBP的含量，结果发现在传染后的3d中均显著的升高，且在1d达到最高值。6通过研究CSN1S1基因启动子区上游STAT5结合区域DNA甲基化在奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎中变化，发现奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎能够促使乳腺组织DNA再甲基化。