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背景:乳腺癌是一种严重危害人类生命健康的恶性肿瘤,是女性中最常见的癌症,也是全球女性癌症死亡的主要原因,由于缺乏足够的分子靶点,在临床上无法彻底治愈。研究表明,肿瘤的血管生成被认为是肿瘤进展和转移所必需的关键环节,是影响肿瘤发生发展的重要因素。血管内皮生长因子(VEGF)作为一种血管生成因子,在新生血管的形成过程中发挥了至关重要的作用。有趣的是,我们发现VEGF在乳腺癌中高表达。由此可见,解析影响VEGF表达的关键调控因子有助于乳腺癌的预防和治疗。VEGF的表达受多种因素的调控,包括细胞因子、生长因子、缺氧、分化、致癌性转化等。GA结合蛋白(GABP)是唯一一种具有专一性的多聚蛋白复合物,由GABPα和GABPβ组成,GABPα参与多种疾病的生理、病理过程。在前期的工作中,我们发现VEGF启动子区存在18-bp的插入缺失变异,生物信息学预测发现18-bp区间中存在GABPα的结合位点,这引起了我们的重视。本研究旨在揭示GABPα调控VEGF的表达进而影响乳腺癌的血管生成的分子机制,为乳腺癌的临床预防和治疗提供新的思路。方法:通过慢病毒感染筛选稳定过表达/干扰GABPα的乳腺癌细胞MDA-MB-231;利用RT-qPCR、Western Blot检测乳腺正常上皮细胞(MCF-10A)及稳定过表达/干扰GABPα乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞系中GABPα和VEGF及增殖凋亡相关基因的表达情况;通过免疫组化检测乳腺癌病人组织样本中GABPα和VEGF的表达情况;通过细胞克隆、划痕实验、Transwell、CCK8、流式细胞技术等实验,检测过表达/干扰GABPα对MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡以及迁移侵袭的影响;通过管形成和CAM实验检测过表达/干扰GABPα对乳腺癌血管生成的影响;通过注射稳定过表达/干扰GABPα乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞系建立裸鼠成瘤模型,测量不同天数的肿瘤大小,最后将肿瘤取出进行H&E染色和免疫组化检测肿瘤组织中GABPα、CD31和VEGF的表达情况,探究GABPα对乳腺癌的血管生成及肿瘤生长的影响;通过ChIP、EMSA、双荧光素酶报告系统等实验来确定GABPα调控VEGF是通过结合VEGF的启动子区来发挥作用。结果:在乳腺正常上皮细胞(MCF-10A)及乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中检测GABPα和VEGF的表达情况,结果显示,相对于正常乳腺上皮细胞,在乳腺癌细胞系中VEGF表达较高,GABPα低表达;在乳腺癌病人的乳腺组织样本及其癌旁组织检测GABPα和VEGF的表达情况,结果显示,相对于癌旁组织,在乳腺癌病人组织样本中VEGF高表达,GABPα低表达。过表达/干扰GABPα可以抑制/促进乳腺癌细胞的增殖迁移侵袭,可以促进/抑制乳腺癌细胞的凋亡。过表达/干扰GABPα能够抑制/促进VEGF的表达。过表达/干扰GABPα可以抑制/促进乳腺癌的血管生成从而影响乳腺癌的肿瘤生长。GABPα通过调控VEGF进而影响乳腺癌的血管生成,进一步的影响乳腺癌的发生发展;同时,证明GABPα对VEGF的调控作用是通过结合VEGF启动子区-1529至-1512间的18-bp位点来实现的。结论:GABPα通过结合VEGF启动子区来影响其转录活性,进而影响VEGF的表达水平,最终调控乳腺癌血管生成以及乳腺癌的发生发展。