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背景:胰腺癌是恶性程度最高的人类恶性肿瘤之一,五年生存率<5%,其早期无典型的临床症状及相应体征,易发生侵袭转移,往往发现时已是中晚期,手术切除率低,放化疗不敏感,预后差。Micro RNA-125b是近年来备受关注的一个小分子RNA,其在多种肿瘤的发生发展过程中起到重要的作用,但在胰腺癌中的研究甚少,具体作用及分子机制尚不明确。目的:探讨micro RNA-125b在胰腺癌中的功能,并进一步揭示其在胰腺癌进展中可能的分子机制。方法:利用生物学信息软件Target Scan等预测micro RNA-125b的潜在靶基因BAK1,并运用双荧光素酶报告基因技术验证micro R-125b与BAK1 3’-UTR区的靶向配对关系;通过q RT-PCR检测micro RNA-125b在胰腺癌细胞株、胰腺癌和癌旁组织以及正常胰腺组织的表达情况,运用western blotting检测胰腺癌细胞株中BAK1的表达;使用慢病毒技术分别构建micro RNA-125b过表达细胞株SW1990-mi R-125b、干扰细胞株PANC-1-anti-mi R-125b及相应对照细胞株,并采用western bloting和免疫荧光染色检测稳转细胞株中BAK1的表达变化;利用吉西他滨或去血清培养方法诱导细胞凋亡,流式细胞凋亡检测仪检测过表达或干扰细胞株的凋亡情况,western blotting验证凋亡相关蛋白Cytochrome C和激活型Caspase-3的变化;体内实验中,将过表达micro RNA-125b的SW1990-mi R-125b细胞及相应对照细胞种植于裸鼠的皮下,随机分为吉西他滨处理组和非处理组,观察micro RNA-125b对胰腺癌细胞成瘤能力的影响,并采用Tunel法和Caspase-3抗体免疫组化检测种植瘤的凋亡情况。结果:Micro RNA-125b在胰腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.05),而后者的表达又轻度高于正常胰腺组织(P<0.05);q RT-PCR和western blotting检测发现,micro RNA-125b和BAK1在8株胰腺癌细胞中均有表达。成功建立了micro RNA-125b过表达及干扰的稳转细胞株,与相应对照组比较,过表达组SW1990-mi R-125b升高了将近80倍(P<0.01),而干扰组PANC-1-anti-mi R-125b下降了90%以上(P<0.01)。双荧光素酶报告基因技术证实了mi R-125b与BAK13’-UTR区的靶向配对关系;western bloting和免疫荧光染色检测也发现,BAK1在SW1990-mi R-125b的表达明显下降,而在PANC-1-anti-mi R-125b的表达则显著上升。流式细胞凋亡检测仪检测发现SW1990-mi R-125b较对照组细胞的凋亡率显著下降(P<0.05),而PANC-1-anti-mi R-125b的凋亡率则明显上升(P<0.05);western bloting进一步证实凋亡相关蛋白Cytochrome C和激活型Caspase-3在SW1990-mi R-125b中的表达较其对照组明显降低,而在PANC-1-anti-mi R-125b的表达则显著升高。体内裸鼠成瘤实验发现,无论是否经过吉西他滨处理,过表达micro RNA-125b组的肿瘤生长均增快,瘤重亦增加;Tunel法和Caspase-3抗体免疫组化进一步对种植瘤组织检测发现,过表达micro RNA-125b组的癌细胞凋亡率明显下降,亦说明micro RNA-125b通过抗肿瘤细胞凋亡而促进肿瘤细胞成瘤。结论:在胰腺癌中,micro RNA-125b通过下调凋亡基因BAK1的表达而阻抑了线粒体凋亡途径,进而起到抑制胰腺癌细胞凋亡的作用;mi R-125b可能降低了胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性并增加胰腺癌细胞对缺血的耐受性。