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植物病毒病是蔬菜种植业的重要限制因素,目前已经成为制约我国蔬菜产业可持续发展的重要因素。番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus, TYLC V),属于双生病毒科菜豆金黄花叶病毒属,引起番茄黄化曲叶病,是通过媒介昆虫-烟粉虱传播的蔬菜生产上的一种毁灭性病害。蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus, BB WV),为世界性流行的病毒,它的寄主范围极广,造成严重的危害,在各产区均有分布。番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus, ToCV)病是从国外传入我国的一种烟粉虱传播的新型病毒病,可以侵染多种植物。本研究主要以TYLCV及其卫星、BBWV口ToCV为主要对象,以PCR技术为基础,对山东省、河南省、河北省和辽宁省蔬菜主产区展开系统调查,目的是摸清蚕豆萎蔫病毒与番茄褪绿病毒的发生分布情况和寄主范围,以及伴随番茄黄化曲叶病毒的卫星分子。研究结果表明,在对山东省、河南省、河北省和辽宁省TYLCV样品的检测过程中,同时利用双生病毒卫星DNA的通用引物beta01/beta02,对TYLCV阳性样品进行了DNAβ的检测,结果发现,山东昌邑县、河南焦作市感病样品可以扩增出约1.3Kb的特异性条带,经序列比对,发现与越南黄化曲叶病毒卫星分子(Tomato yellow leaf curl Vietnam betasatellite(TYLCVNB)一致性为88%,均为越南黄化曲叶病毒卫星DNAβ分子,表明山东省、河南省TYLCV分离物中含有这种新型的DNAβ分子,这是国内首次发现T YLCV病毒DNA-A与越南黄化曲叶病毒卫星DNAβ以病害复合体形式存在。通过检测和序列分析,基本确定了TYLCV病毒伴随卫星分子的主流种类和其发生蔓延、分子变异及流行趋势等;基本摸清了BBWV病毒在山东省辣椒主产区的发生分布情况。从山东省共采集到55份辣椒样品,采用蚕豆病毒属的引物BBWV-R1F/R1R, R2F-1F/R2F-1R,及包含有LCP与SCP的引物,对供试辣椒病株进行BBWV的RT-PCR扩增,分别扩增到大小约为57Obp、1.3Kb、600bp、1.4Kb的特异性条带,筛选出3株阳性样品,与预期结果一致,获得2条BBWV2-RNA2包含SCP及部分LCP序列,证实了采集的山东昌邑、青州辣椒样品被蚕豆萎蔫病毒病毒侵染。其中,BBWV2-RNA1序列与韩国分离物RP4具有较高的序列同源性,为94.61%,BBWV2-RNA2与韩国分离物AF104335一致性可达96.03%,首次报道采用了RT-PCR法从山东辣椒上检测到BBWV2,并将该分离物的核酸序列与国内发现的其他BBWV2分离物进行分析;通过对河北多个县市的番茄种植区调查,基本摸清了ToCV病毒在河北省的发生分布情况。从9个地区共采集到290份番茄样品、48份杂草样品,以ToCV外壳蛋白和热激蛋白共3对特异引物对ToCV疑似样品进行检测,分别扩增到约1032bp、943bp和911bp的特异条带,其中132份番茄样品带有ToCV,而在杂草上并未检测到阳性样品。同时对疑似病样进行另一种严重发生的番茄黄化曲叶病毒复合侵染情况的检测,从部分样品中扩增得到约833bp的核苷酸序列,确定田间存在ToCV和TYLCV复合侵染。序列比对发现,河北地区番茄样品的ToCV分离物之间序列一致性最高达99.7%,与日本、北京分离物最高分别达到99.5%与99.7%,获得了ToCV番茄分离物CP、HSP70全序列,这是国内首次明确河北地区番茄受到番茄褪绿病毒的侵染。