Sonic hedgehog蛋白对永久性脑缺血的大鼠血脑屏障的保护作用及机制研究

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目的:Shh蛋白对永久性脑缺血大鼠血脑屏障的保护及其机制的研究  方法:采取改良线栓法制作SD大鼠左侧大脑中动脉栓塞模型(MCAO),术后立即进行侧脑室注射并分别给予rHuShh(Shh组)、PBS(PBS组)、rHu Shh+Cyclopamine(Shh+ Cyc组),并于1天后观察神经行为缺损评分,采用干湿称重法检测模型大鼠脑水肿,应用依文斯蓝外渗法检测血脑屏障通透性,TTC法检测模型梗塞面积,应用实时荧光定量PCR检测梗塞灶边缘区Ang-1及血脑屏障相关分子(ZO-1, occludin, claudin-5)的mRNA表达水平,免疫印迹法检测上述分子表达水平。原代培养星形胶质细胞和大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs),应用糖氧剥夺模拟体外缺血模型,给予Shh、PBS、Shh+ Cyc预处理,4小时后采用ELISA检测Ang-1表达水平,分别应用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测Ang-1及血脑屏障相关关键分子(ZO-1、occludin、claudin-5)的mRNA和蛋白表达水平。  结果:(1)侧脑室注射Shh可以显著减轻脑缺血导致的神经功能缺损,减轻脑水肿,降低血脑屏障通透性,减小梗塞面积;Shh导致缺血梗塞区边缘ZO-1,occludin、claudin-5、Ang-1的mRNA水平和蛋白水平的表达增高;Cyc可以逆转Shh对上述分子的表达调控及对血脑屏障的保护作用;(2)Shh可显著升高OGD处理的原代星形胶质细胞Ang-1的表达及分泌水平; Shh可提高OGD处理BMECs中ZO-1, occludin、claudin-5、Ang-1的mRNA水平和蛋白水平的表达,应用Ang-1抗体可以逆转Shh对脑微血管内皮细胞的作用。  结论:外源性Shh可促进星形胶质细胞分泌Ang-1作用于脑微血管内皮细胞,增加ZO-1, occludin,、claudin-5的表达,减少血脑屏障破坏及渗漏。
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作为一名班主任,我一直追求着这样一种境界:在我的班级里,每一名学生都在明媚的阳光中追求真知,奉献爱心,实现自我,感受成功。人人都能以宽容的心态去对待他人的每一次过失,用期待的心态去等待他人的每一点进步,用欣赏的目光去关注他人的每一个闪光点,用喜悦的心情去赞许他人的每一份成功。  乌申斯基说过:‘教师个人的范例,对于学生的心灵是任何东西都不能代替的最有用的阳光,学生对教师有着一种特殊的信任和依赖情感