山丹鳞茎总黄酮提取分离及抗氧化和抑菌活性的研究

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以山丹鳞茎为原料,提取、分离纯化山丹鳞茎中总黄酮化合物,探讨其具有的抗氧化能力以及抑菌效果,为山丹的开发及利用提供参考。实验的主要结果如下:1.使用紫外-可见分光光度计确定显色后芦丁的测定波长,定性分析结果表明山丹鳞茎中含有黄酮类化合物,在单因素实验的基础上,采用响应面法有了山丹鳞茎中总黄酮的提取工艺为乙醇体积分数73%,料液比32:1mL/g,回流温度69℃,回流时间120min。结果表明总黄酮含量实验值4.685mg/g与预测值4.729mg/g基本一致,相对标准偏差(RSD)为0.661%,表明所得工艺参数可靠。2.研究AB-8大孔树脂对山丹鳞茎中总黄酮的吸附和洗脱作用,并研究相关的工艺条件。结果表明上样原液浓度为3.165mg/mL,pH值为4,1.0mL/min的流速吸附,用70%的乙醇进行洗脱,使提取物中总黄酮含量提高到35.13%。表明AB-8大孔树脂可较好的纯化山丹鳞茎中的总黄酮。3.利用三种体外抗氧化体系,即超氧阴离子清除能力、羟基自由基清除能力和二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除能力对山丹鳞茎总黄酮提取物的体外抗氧化活性进行了综合评价。结果表明山丹鳞茎总黄酮的抗氧化活性较强,且与总黄酮的浓度呈现明显的量效关系。山丹鳞茎总黄酮对超氧根阴离子的清除率为63.27%,对羟基自由基的清除率为70.36%,对DPPH自由基的清除率为52.83%,在实验浓度范围内优于二丁基羟基甲苯(BHT)的清除能力,说明山丹鳞茎总黄酮对实验所选自由基具有较好的清除能力。4.以抑菌效果为评价指标,采用打孔法测定山丹鳞茎总黄酮提取物对白色念球菌、白色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、柠檬色葡萄球菌、伤寒杆菌、稻瘟菌、番茄灰霉菌、苹果腐烂病菌、西瓜枯萎病菌共9种菌的最低抑菌浓度,以评价其抑菌性能,结果表明最小抑菌浓度(MIC)值分别为:白色念球菌的MIC为80mg/mL,白色葡萄球菌的MIC为10mg/mL,福氏痢疾杆菌的MIC为80mg/mL,柠檬色葡萄球菌的MIC为40mg/mL,伤寒杆菌的MIC为100mg/mL,稻瘟菌的MIC为60mg/mL,番茄灰霉菌的MIC为80mg/mL,苹果腐烂病菌的MIC为40mg/mL,西瓜枯萎病菌的MIC为60mg/mL。山丹鳞茎总黄酮提取物对9种菌均有不同程度的抑制作用,证明其具有抑菌性。
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