中国孤雌生殖卤虫十个地理品系的DNA指纹分析与进化

来源 :辽宁师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:giaobiao123
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本文应用RAPD及ISSR两种分子生物学方法对中国孤雌生殖卤虫十个地理品系的DNA指纹进行分析与鉴定,对等位基因和基因座位在孤雌生殖卤虫种群中的数量和分布情况、孤雌生殖卤虫种群各品系间的遗传相似系数和遗传距离、各品系遗传相似系数的聚类分析、卤虫各品系基因组DNA的多态组成等内容进行了较深入的研究.采用优化后的随机扩增多态DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,简称RAPD)技术,用经筛选的40个10bp随机引物对中国孤雌生殖卤虫十个地理品系的基因组DNA进行扩增,以期从分子水平上了解十个不同地区的孤雌生殖卤虫的遗传结构,比较它们之间的遗传差异.在扩增出的422条多态片段中,其中371条(87.91%)表现为多态,平均每个引物扩增出10.55个位点.以遗传相似系数所作的聚类分析图可以把中国孤雌生殖卤虫分为三个主要类群:1.新疆巴里坤、青岛尕海卤虫品系;2.新疆艾比湖卤虫品系;3.辽宁、山东、河北卤虫品系.ISSR(inter simple sequence repeats)也称锚定简单重复序列(anchored simplesequence repeats,ASSR),用锚定的微卫星DNA为引物,即在SSR序列的3端或5端加上2-4个随机核苷酸,从而保证了引物与基因组DNA中SSR的5和3末端结合,通过PCR反应扩增SSR之间的DNA片段.SSR在真核生物中的分布是非常普遍的,并且进化变异速度非常快,因而锚定引物的ISSR-PCR可以检测到基因组许多位点的差异.它继承了PCR技术的高效率、DNA样品用量少、特异性强和检测方便等优点,并具有SSR的稳定性,与RAPD技术相比,有明确的针对性、更高的多态性.本研究运用合成的14个ISSR引物进行ISSR-PCR扩增,共检测到170个位点,其中156个(91.76%)表现为多态,平均每个引物扩增出12.14个位点,具有较强的多态性.ISSR以其简便快捷的特点己开始应用于动植物指纹图谱分析及遗传多样性的研究.
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