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应激是机体受到应激性刺激后所产生的一种特异性反应,适当的应激对机体是有益的,但是应激过强或者持续时间过长可以导致组织和器官的病理性损伤,甚至造成动物猝死。实验一选取生长状况相似健康的7周龄AA肉鸡40只,随机分成4组,每组10只,分别运输2h、3h、4h和5h。结束后立即剖杀,取心、肝、脾、肺、肾、胸腺等不同组织一份置于10%甲醛中,H-E染色光学显微镜下观察并拍照。同样两份样品用液氮速冻后放入-80℃冰箱。用于mRNA的定量检测。实验二选取生长状况相似健康的7周龄AA肉鸡50只,随机分成5组,每组10只,对各处理组分别进行限饲Oh、4h、6h、8h、10h的处理,结束后立即剖杀,取心、肝、脾、肺、肾、胸腺等不同组织一份置于10%甲醛中,H-E染色光学显微镜下观察并拍照。同样两份样品用液氮速冻后放入-80℃冰箱。用于mRNA的定量检测。利用荧光定量PCR技术进一步分析,不同应激条件下相关基因在肉鸡组织中的表达规律。研究结果表明:1)运输应激初期(2h)多数组织出现毛细血管扩张充血、细胞肿胀等急性病理性变化。运输3到4小时各组织的病理改变与初期相似但有所加重,运输5小时心脏出现了心肌纤维的断裂,胸腺、脾、肾出现了功能衰竭等现象。运输应激可导致组织细胞应激性损伤,并且组织损伤的程度随着运输时间的延长而有所波动。2)禁食应激初期(0h)多数组织出现毛细血管扩张充血、细胞肿胀等急性病理性变化。禁食4到8小时各组织的病理改变与初期相似但有所加重,但肝脏的脂防变性有所减轻。禁食12小时,肝脏的脂肪变性进一步减轻,肺脏有明显的肺不张,胸腺、脾、肾出现了严重的功能衰竭等现象。禁食应激可导致组织细胞应激性损伤,并且组织损伤的程度随着禁食时间的延长而有所波动。3)运输2小时,肾脏中HSP90基因的相对表达量显著高于其它各组织(P<0.05),心脏、肝脏、肺脏中HSP90基因的相对表达量显著高于脾脏和胸腺(P<0.05),运输3小时肾脏中HSP90基因的相对表达量显著高于其它各组织(P<0.05),运输5小时肝脏中HSP90基因的相对表达量显著高于其它各组织(P<0.05)。运输时间不同的条件下,除了肾脏中HSP90基因相对表达呈现下降的趋势外,其它各组织中的HSP90基因相对表达量均呈现不同程度的增加。运输2小时心脏中bcl-2基因的相对表达量显著高于脾脏、肺脏和胸腺(P<0.05),运输3小时肺脏中bcl-2基因的相对表达量显著高于其他组织(P<0.05),肾脏中bcl-2基因的相对表达量显著高于肝脏和脾脏。运输5小时心脏、肝脏和肺脏中bcl-2的相对表达量显著高于脾脏、肾脏和胸腺(P<0.05),当运输时间不同的条件下,除心脏和肺脏中bcl-2呈现上升的趋势外,其他各组织的bcl-2表达均下降。运输2小时肾脏中caspase3基因的相对表达量显著其他各组织(P<0.05),脾脏和肺脏中caspase-3基因的相对表达量显著高于心脏(P<0.05),运输3小时心脏中caspase3基因的相对表达量显著其他各组织(P<0.05),运输5小时肺脏和胸腺caspase-3基因的相对表达量显著其他各组织(P<0.05)。当运输时间不同的条件下,除了脾脏和肾脏中caspase-3基因相对表达呈现下降的趋势外,其它各组织中的caspase-3基因相对表达量均呈现不同程度的增加。4禁食0小时肾脏中HSP90基因的相对表达量显著高于其它各组织(P<0.05)。禁食6小时肾脏中HSP90基因的相对表达量显著高于其它各组织(P<0.05)。禁食10小时肾脏中HSP90基因的相对表达量显著高于其它各组织(P<0.05),肝脏中HSP90基因的相对表达量显著高于心脏、脾脏、肺和胸腺(P<0.05),当运输时间均为2小时,禁食时间为不同的条件下,各组织中的HSP90基因相对表达量珺呈现不同程度的增加。禁食0小时心脏中bcl-2基因的相对表达量显著高于脾脏、肺脏和胸腺(P<0.05),禁食6小时胸腺中Bcl-2基因的相对表达量显著著高于心脏、肝脏和脾脏(P<0.05),禁食10小时心脏和肝脏bel-2的相对表达量显著高于其他各组织(P<0.05)。禁食时间不同的条件下,除了脾脏和肾脏中bel-2基因相对表达呈现下降的趋势外,其它各组织中的bcl-2基因相对表达量均呈现不同程度的增加。禁食0小时肾脏中caspase3基因的相对表达量显著其他各组织(P<0.05),脾脏和肺脏中caspase-3基因的相对表达量显著高于心脏(P<0.05).禁食6小时肾脏和胸腺中caspase-3基因的相对表达量显著高于心脏、肝脏和脾脏P<0.05)。禁食10小时心脏中caspase-3基因的相对表达量显著高于肝脏、脾脏、肺脏和胸腺(P<0.05),肾脏中caspase-3基因的相对表达量显著高于脾脏和肺脏(P<0.05)。当禁食时间不同的条件下,除了脾脏和肺脏中caspase-3基因相对表达呈现下降的趋势外,其它各组织中的caspase3基因相对表达量均呈现不同程度的增加。本实验利用组织学及病理学方法研究不同强度的运输应激对AA肉鸡不同组织造成的影响。探讨应激强度与鸡应激性损伤之间的相关性,为研究运输应激提供科学的理论基础和试验依据。并通过荧光定量PCR技术得出了HSP90、bcl-2和caspase3基因在肉鸡不同组织中的表达规律,揭示了细胞凋亡途径在运输应激过程中发挥着重要作用,为研究运输应激对肉鸡影响的分子机理奠定了坚实的基础。