论文部分内容阅读
冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary artery heart disease,CHD)简称冠心病,是指由多种致病因素导致冠状动脉(冠脉)粥样硬化,从而引起管腔狭窄或闭塞,导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏疾病。急性冠脉综合征(Acute coronary syndrome,ACS)是冠心病中最严重、最常见的类型,是心血管疾病中致死、致残的主要原因,近年来发病呈年轻化趋势,严重威胁着人类健康。ACS的早期诊断及准确及时的病情和预后估计是采取有效治疗措施并保证心脏及时再灌注以减少死亡率的必要条件。许多学者运用各种生物学标志物从冠心病的病理生理机制,如氧化应激、炎症、心肌损伤等方面研究并揭示了它们与疾病的发生、发展规律等方面的相关性,对冠心病的诊断、治疗及管理发挥了重要作用。然而,单一的生物标志物一般只反映疾病发生的某个环节,检测也具有局限性,因此国内外不少学者推荐多种生物标志物联合诊断冠心病,从多方面评估病情,并为疾病治疗提供有效靶点。 研究表明,长链非编码 RNA(lncRNAs)能以 RNA的形式在多种层面上调控基因的表达,参与剂量补偿效应、细胞发育分化、基因组印记等重要生物学过程,成为当前心血管疾病研究的热点之一。国内学者研究发现 lncRNAs能促进动脉粥样硬化炎症反应。lncRNA-MIAT(心肌梗死相关转录本)转录区内多个 SNPs(单核苷酸多态性)与心肌梗死易感性相关,可能在转录后水平(剪接)调节基因表达,但 MIAT在心梗的作用机制仍不明确。反义 RNA2缺氧诱导因子1α(lncRNA-aHIF)是一种天然的HIF1α(缺氧诱导因子1α)反义转录本,在心衰患者中表达升高,通过调节 HIF1α的 mRNA来调控新生血管生成,这对心肌缺血而言是一种重要的反馈调节。基于以上研究本课题组推测lncRNAs可能为冠心病领域新的生物学标记物和治疗靶点,但是目前相关文献报道较少,因此本实验对 ACS患者外周血单个核细胞(PBMCs)中 aHIF及MIAT进行初步研究,以考察两者与ACS患者之间的关联性。 目的: 1.探究aHIF、MIAT在ACS患者中表达水平以及是否对ACS有诊断价值。 2.分析aHIF、MIAT是否具有预测冠脉病变严重程度的作用。 3.探究aHIF、MIAT与cTnI、CK-MB之间的相关性。 方法: 按照本研究的纳入标准和排除标准收集2015年5月至2015年12月期间于广州医科大学附属第二医院心血管内科住院部105例急性冠脉综合征(ACS)患者的外周血标本,其中急性心肌梗死(AMI)患者和不稳定型心绞痛(UA)患者分别为55例和50例,依次简称ACS组、AMI组和UA组,其中将AMI组又分为非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)组和ST段抬高型心肌梗死(STEMI)组。选取60例同期非缺血性胸痛患者外周血标本作为对照组。将所有入选患者根据病变血管支数又分为无病变血管组、单支病变组、两支病变组和三支病变组。入院次日清晨空腹抽取所有患者静脉血3mL,采用EDTA抗凝,分离 PBMCs中的总RNA,采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各样本aHIF和MIAT表达水平。将所有血标本送至我院检验科检测肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、hs-CRP等指标。所有数据采用SPSS18.0软件进行统计学分析。 结果: 1.年龄与性别在非 CHD对照组与 ACS组之间无明显差异(P>0.05),而吸烟史、糖尿病史、高密度脂蛋白胆固醇、肌钙蛋白I、肌酸肌酶、肌酸肌酶MB同工酶、糖化血红蛋白水平在ACS组高于对照组(P<0.05)。 2.与非 CHD对照组相比较, aHIF表达水平在 ACS组明显升高( P<0.05),MIAT表达水平在 ACS组明显降低(P<0.05)。且 aHIF在 UA组, NSTEMI组、STEMI组中表达较对照组均有上调( P<0.05),而 UA组、NSTEMI组及STEMI组三组之间无明显差异。MIAT在NSTEMI组、STEMI组中表达较对照组和UA组均有下调(P<0.05),NSTEMI组与STEMI组两组间无明显差异,UA组与对照组之间无明显差异。 3.aHIF在无病变血管组、单支病变组、两支病变组及三支病变组之间无明显差异。MIAT在两支病变组较无病变血管组、单支病变组和三支病变组升高(P<0.05),无病变血管组、单支病变组及三支病变组三组之间 PBMCs中MIAT表达水平无明显差异。 4.aHIF、MIAT表达水平均与 hs-CRP呈正相关(P<0.05),r分别为0.316和0.308。 5.aHIF表达与 CK-MB(r=0.399)、cTnI(r=0.525)呈正相关(P<0.05),而MIAT与CK-MB、cTnI尚未发现有明显相关性。 6.建立受试者工作特征曲线评估 aHIF及 MIAT对于 ACS及 AMI诊断的价值,发现预测 aHIF对 ACS及 AMI的诊断价值相应的 ROC曲线下面积分别为0.791(95%置信区间:0.741~0.840,P<0.01)、0.838(95%置信区间:0.78~0.895, P<0.01),切点位置敏感度及特异度分别为60.2%、82%和59%、98%。MIAT对ACS及AMI诊断的ROC曲线面积均小于0.5。综合aHIF及cTnI两者联合预测对ACS及AMI诊断价值,ROC曲线下面积、敏感度、特异度分别为0.891、81%、99%和0.998、96%、100%。 7.Gensini评分值与aHIF(r=0.227,P<0.05)表达水平呈弱正相关。而Gensini评分值与MIAT表达水平及Syntax评分值与aHIF、MIAT表达水平未见明显相关性。 结论: 1.aHIF的PBMCs中表达水平与ACS显著正相关,有可能成为ACS,尤其是AMI诊断新的生物标记物。MIAT对AMI的诊断可能有一定帮助。 2.aHIF与冠脉病变严重程度有一定相关性,联合cTnI指标进行诊断可以提高ACS、AMI诊断效率。