动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是心血管疾病的病理基础，其发病机制备受关注但至今尚未阐明。近年来研究表明，AS是一个慢性炎症免疫过程，炎症参与动脉粥样硬化的形成和斑块破裂过程，炎症和免疫反应不仅在动脉粥样硬化的发生、发展过程中具有重要作用，而且在易损斑块的发生、发展与易损斑块破裂中也起着关键的作用。各种心血管危险因素通过炎症和免疫反应损伤血管，许多炎症细胞如单核细胞参与斑块的形成，其中炎性受体发挥了重要作用。TOLL样受体(Toll—like receptors，TLRs)是近年来克隆出来的跨膜信号转导受体家族，是连接先天免疫和特异性免疫的纽带。最近对Toll样受体4(Toll—like receptor4，TLR4)在AS中作用的研究成为新的研究热点。 TLR4表达于所有的细胞系，在外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞均有表达，以单核细胞表达为主，TLR4可以识别多种内源性和外源性配体，如脂多糖(lipopolysa—ccharide，LPS)、热休克蛋白(heat shock proteins，HSP)等。TLR4可通过LPS信号通道，介导炎症反应，产生肿瘤坏死因子—α(Tumor necrosis factor，TNF—α)、白介素—6(interleukin—6，IL—6)等多种促炎症因子，可引起局部或全身性的炎症损伤[3]，是导致炎症性损害的主要环节。由于TLR4在识别LPS及介导的炎症反应信号转导中的重要作用，其作为炎症跨膜受体在心血管疾病中的作用也越来越多的引起关注。实验研究表明，TLR4参与了AS的形成和发展，但TLR4在炎症、免疫反应中的分子生物学机制至今还未阐明。 C反应蛋白(C reactive protein，CRP)通常作为独特的炎性标记物来检测炎症反应性疾病，其被认为是炎症标志物中预测冠脉事件的最强指标。实验证明：CRP不仅是理想的炎症标志物和心血管疾病发生发展的强有力预测因子，还可以作为动脉粥样硬化中炎性活化因子，导致内皮活化和单核巨噬细胞聚集，在炎症及动脉粥样硬化发生发展过程中也起到重要的作用。但是，CRP在易损斑块和易损斑块破裂的炎症机制中所扮演的角色尚未明了，是否属与TLR4相关，是否通过TLR4模式受体介导而产生炎症反应，尚未见明确报道。 研究目的： 1.观察急性冠脉综合征患者(Acute coronary syndrome，ACS)、稳定型心绞痛(Stable angina pectoris，SAP)患者和对照组血浆内毒素水平，了解ACS患者血浆内毒素水平与其他组的异同； 2.检测冠心病患者外周血白细胞分化抗原14阳性(Cluster of differentiation-14，CD14+)单核细胞TLR4蛋白、mRNA和髓样分化蛋白2(myeloid differentiation protein—2，MD—2) mRNA的表达变化； 3.了解ACS患者CRP与外周血CD14+单核细胞TLR4介导的炎症反应的相关性。从而进一步探讨CRP在ACS患者中的致炎作用，以及作用的细胞分子机制。 4.观察ACS患者CRP与血清炎性因子肿瘤坏死因子—α(tumor necrosis factor，TNF—α)浓度的相关性。 5.初步探讨TLR4介导的信号通道在冠心病发病中的作用，了解其致炎作用的细胞分子机制，为临床治疗急性冠脉综合征提供新的思路。 研究方法： 选择45例经临床诊断为冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary artery disease，CAD)的患者，其诊断根据典型的临床表现、心肌酶学、心电图等指标，符合世界卫生组织(World Health Organization，WHO)关于冠心病的诊断标准。急性冠脉综合征组25例，其中急性心肌梗死16例，男9例，女7例；不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris，UAP)9例，男5例，女4例，ACS组的平均年龄63.5±11.1岁；稳定型心绞痛(stable angina pectoris，SAP)组20例，男11例，女9例，平均年龄62.7±10.6岁；对照组共入选20例体检者，既往无冠心病史，血常规、血脂、肝肾功能指标均正常，无其他自身免疫性疾病及感染性疾病表现，其中男13例，女7例，平均年龄61.2±11.6岁。 以上入选者于入院时采集外周静脉血14ml，提取单核细胞，进行单核细胞培养并收集血浆、血清备用。用流式细胞仪检测单核细胞TLR4的表达；运用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction，RT—PCR)法和实时定量PCR(Real—time quantitative polymerase chain reaction)测定入选者的外周血单核细胞TLR4mRNA、MD—2 mRNA表达；血浆LPS含量用鲎试剂法检测；凝集法检测血清CRP水平；血清TNF—α的浓度测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(Enzyme—linked immunsorbent assay，ELISA)；全自动生化分析仪测定所有入选者血脂水平。 统计学分析：三组间比较用One—Way ANOVA单因素方差分析，两两间比较用LSD—t(least significant difference，LSD—t)检验。计量资料采用直线相关分析和偏相关分析，P<0.05认为有统计学显著性差异。应用SPSS For Windows13.0统计软件进行统计学分析。 结论： 1.ACS患者外周血CD14+单核细胞TLR4蛋白和TLR4 mRNA及MD—2mRNA的表达显著高于SAP组及对照组。 2.ACS组与SAP组、对照组血浆内毒素水平无显著性差异；ACS组血清CRP、TNF—α浓度显著高于SAP组及对照组。 3.直线相关和偏相关分析显示：ACS患者血浆LPS水平与外周血CD14+单核细胞TLR4 mRNA无显著相关性；血清CRP水平与外周血CD14+单核细胞TLR4蛋白表达、血清TNF—α水平呈显著性正相关。 4.ACS患者外周血CD14+单核细胞TLR4 mRNA和MD—2 mRNA表达呈显著性正相关；通过直线相关和偏相关分析，外周血CD14+单核细胞TLR4 mRNA表达与血清TNF—α水平呈显著性正相关。