复方青黛颗粒联合柳氮磺胺嘧啶对溃疡性结肠炎大鼠CRP及炎性细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-4影响的实验研究

来源 :四川医科大学 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wufang78
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目的:本实验通过建立TNBS/乙醇诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,在复方青黛颗粒基础上联合应用柳氮磺胺嘧啶(SASP)治疗UC大鼠,观察中西医结合疗法(SASP+复方青黛颗粒)对UC大鼠的治疗效果及对UC大鼠CRP与炎性细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-4的影响,分析评价各个统计指标的动态变化及临床意义,并通过对中西医结合疗法与单独柳氮磺胺嘧啶、复方青黛颗粒治疗UC的疗效及其差异的比较,探讨中西医结合治疗UC的有效性及可能的作用机制,从而为中西医结合治疗UC提供更多的理论及临床依据和动物实验数据。  方法:SD雄性大鼠50只,随机分为空白对照组、模型对照组、SASP组、复方青黛颗粒组和中西医结合组,每组10只,除空白对照组外,其余各组给予TNBS/乙醇造模,然后将造模成功的大鼠及空白对照组大鼠给予相应处理: SASP组给予SASP(500mg/kg)混悬剂5毫升/次,复方青黛颗粒组给予复方青黛颗粒(1200mg/kg)混悬剂5毫升/次,中西医结合组给予复方青黛颗粒(1200mg/kg)与SASP(500mg/kg)混悬剂5毫升/次,空白对照组及模型对照组分别给予灭菌用水5毫升/次。于造模后第3天开始灌胃治疗,连续给药两周。实验期间每日记录大鼠体重、毛发光泽、大便性状和便血情况并给予疾病活动指数(DAI)评分。实验结束时及结束后采用双抗体夹心酶联免疫吸附法分别测定大鼠血清CRP、TNF-α和结肠粘膜组织IL-1β及IL-4的含量,并行结肠粘膜组织损伤程度评分及HE染色镜下观察。  结果:1、DAI评分:实验结束时各组DAI评分,与模型对照组比较,中西医结合组能够明显降低UC大鼠DAI评分(0.85±0.65vs2.85±0.58, P<0.01),SASP组(1.05±0.58vs2.85±0.58,P<0.01),复方青黛颗粒组(1.10±0.73vs2.85±0.58,P<0.01); SASP组与复方青黛颗粒组比较(1.05±0.58vs1.10±0.73,P=0.17),差异无统计学意义;与中西医结合组比较,SASP组(1.05±0.58vs0.85±0.65,P<0.01),复方青黛颗粒组(1.10±0.73vs0.85±0.65,P<0.01),差异具有显著统计学意义。2、结肠粘膜组织损伤评分:实验结束后行各组结肠粘膜损伤评分,与模型对照组比较,中西医结合组能够明显降低结肠粘膜损伤评分(0.70±0.48vs3.30±0.82,P<0.01),SASP组(1.50±0.53vs3.30±0.82,P<0.01),复方青黛颗粒组(1.20±0.42vs3.30±0.82,P<0.01); SASP组与复方青黛颗粒组比较(1.50±0.53vs1.10±0.73,P=0.24),差异无统计学意义;与中西医结合组比较,SASP组(1.50±0.53vs0.70±0.48,P<0.01),差异具有显著统计学意义,复方青黛颗粒组(1.20±0.42vs0.70±0.48,P=0.54),差异无统计学意义。3、血清CRP含量的检测:实验结束后血清CRP含量与空白对照组比较,模型对照组血清CRP水平明显升高(122.13±13.15vs42.69±9.47,P<0.01);与模型对照组比较,中西医结合组降低血中CRP最为明显(69.03±4.95vs122.13±13.15, P<0.01), SASP组(81.77±8.65vs122.13±13.15, P<0.01)和复方青黛颗粒组(86.27±4.55vs122.13±13.15,P<0.01)亦明显下降;SASP组与复方青黛颗粒组比较(81.77±8.65vs86.27±4.55,P=0.256),差异无统计学意义;与中西医结合组比较,SASP组(81.77±8.65vs69.03±4.95,P<0.05),复方青黛颗粒组(86.27±4.55vs69.03±4.95,P<0.05),差异具有统计学意义。4、血清TNF-α含量检测:实验结束后血清TNF-α含量与空白对照组比较,模型对照组血中TNF-α水平明显升高(151.54±14.32 vs62.70±11.13,P<0.01);与模型对照组比较,中西医结合组降低血清TNF-α较为明显(80.49±6.68vs151.54±14.32,P<0.01),SASP组(99.21±3.17vs151.54±14.32,P<0.01)和复方青黛颗粒组(103.93±7.27vs151.54±14.32,P<0.01)亦有下降;SASP组与复方青黛颗粒组比较(99.21±3.17vs103.93±7.27,P=0.265),差异无统计学意义;与中西医结合组比较,SASP组(99.21±3.17vs80.49±6.68,P<0.05),复方青黛颗粒组(103.93±7.27vs80.49±6.68,P<0.05),差异具有统计学意义。5、结肠粘膜组织IL-1β含量检测:实验结束后结肠粘膜组织IL-1β含量与空白对照组比较,模型对照组结肠粘膜IL-1β水平明显升高(148.93±10.77 vs38.93±8.23,P<0.01),与模型对照组比较,中西医结合组降低IL-1β最为明显(63.91±5.81vs148.93±10.77,P<0.01),SASP组(81.72±3.74vs148.93±10.77,P<0.01)和复方青黛颗粒组(85.84±6.95vs148.93±10.77,P<0.01)亦有明显下降;SASP组与复方青黛颗粒组比较(81.72±3.74vs85.84±6.95,P=0.225),差异无统计学意义;与中西医结合组比较,SASP组(81.72±3.74vs63.91±5.81,P<0.05),复方青黛颗粒组(85.84±6.95vs63.91±5.81,P<0.05),差异具有统计学意义。6、结肠粘膜组织IL-4含量检测:实验结束后结肠粘膜组织IL-4含量与空白对照组比较,模型对照组结肠粘膜IL-4水平明显下降(81.88±6.68vs142.59±8.01,P<0.01);与模型对照组比较,中西医结合组升高IL-4明显(130.63±9.80vs81.88±6.68,P<0.01),SASP组(114.01±10.37vs81.88±6.68,P<0.01)和复方青黛颗粒组(109.90±10.09vs81.88±6.68,P<0.01)亦有升高;SASP组与复方青黛颗粒组比较(114.01±10.37vs109.90±10.09,P=0.317),差异无统计学意义;与中西医结合组组比较,SASP组(114.01±10.37vs130.63±9.80,P<0.01),复方青黛颗粒组(109.90±10.09vs130.63±9.80,P<0.01),差异具有显著统计学意义。  结论:1、在TNBS/乙醇诱导的大鼠UC模型中,CRP能够灵敏及客观的反映疾病的病情状态、治疗效果及进行预后判断;2、促炎细胞因子IL-1β及TNF-α的生成增加和抗炎细胞因子IL-4的减少在UC的形成及病理变化中起着重要的作用,抑制促炎细胞因子IL-1β及TNF-α的生成和促进抗炎细胞因子IL-4的表达增加能够有效治疗UC及抑制其病理变化,促进UC痊愈,是有效阻断或减轻UC病理改变的主要途径之一;3、SASP组和复方青黛颗粒组均能一定程度的改善结肠组织学评分,降低促炎细胞因子IL-1β和TNF-α水平及升高抗炎细胞因子IL-4的水平,从而有效治疗TNBS/乙醇诱导的大鼠UC,且两者疗效相当,差异无显著统计学意义,与既往研究结果不一致;4、复方青黛颗粒联合柳氮磺胺嘧啶的中西医结合疗法较单独SASP、复方青黛颗粒能够更加有效地改善UC大鼠的组织学评分、逆转结肠粘膜组织病理改变,抑制促炎细胞因子IL-1β及TNF-α的生成和促进抗炎细胞因子IL-4的表达增加;5、复方青黛颗粒联合柳氮磺胺嘧啶治疗大鼠UC的机制可能是通过复方青黛颗粒与SASP协同作用,降低促炎细胞因子IL-1β和TNF-α的水平,增加抗炎细胞因子IL-4的水平,诱导Th0向Th1转化,从而恢复Th1/Th2的平衡有关。
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