【摘 要】
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DNA甲基化是生物表观遗传的一种重要的形式,在基因表达,细胞生长与分化方面具有重要的作用。本研究以不育系BS366及恢复系京411为材料,利用芯片数据分析技术对48个小麦(Triti
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DNA甲基化是生物表观遗传的一种重要的形式,在基因表达,细胞生长与分化方面具有重要的作用。本研究以不育系BS366及恢复系京411为材料,利用芯片数据分析技术对48个小麦(Triticum urartu L.C5-甲基化酶序列进行分析,获得8个具有明显差异表达的DNA甲基化酶基因。利用MEGA5.0对8个基因序列与已研究报道的玉米、拟南芥、水稻甲基化酶基因进行比较构建进化树,将这些基因分为四个亚家族。聚类结果表明小麦的差异表达基因中没有归属于Dnmt2家族,聚类到同一家族的差异表达基因具有相似的基因结构和保守域。根据保守域分析推测TaDMT203因缺少BAH对甲基化位点不能特异性识别,而TaDMT204基因丢失了 UBA保守,在受到外界刺激时不能通过泛素化来响应。不可育环境中,TaDMT201,TaDMT202,TaDMT204及TaDMT206在07HY91-43 × BS366和7P395 × BS366杂交种雄蕊中的表达量显著增加,此外花粉碘染结果显示在可育环境下杂交种中可育花粉粒明显多于不可育环境,7P395× BS366表现尤为显著。mRNA的降解组测序表明miRNAs Tae-miRNA68,Tae-miRNA68,Tae-miRNA117 及 Tae-miRNA201 的目标基因分别是TaDMT201,TaDMT202,TaDMT204 TaDMT206。其中,不同处理下TaDMT201,TaDMT202,TaDMT204,TaDMT206与其相对应的miRNA在表达量上呈现一定程度的负相关。不可育环境下对BS366和三个杂交种中TaRAFTIN1a基因启动子区域甲基化进行分析,结果表明7P395×BS366的甲基化水平最高。杂交种与不育系中TaRAFTIN1a启动子只有两个CHG位点的甲基化程度不同,而花粉粒的育性差别很大,因此猜测这两个位点的甲基化影响该基因的表达。根据研究数据可以推测microRNAs和TaDMTs通过基因甲基化参与调控花粉发育基因TaRAFTIN1a的表达及结实率,这为F1代小麦雄蕊发育机制研究提供了一定的理论基础。
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