【摘 要】
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嗅觉系统在昆虫的生存和繁殖中起着非常重要的作用,昆虫对气味的感知极其灵敏和有选择性,这使得昆虫可以探测到环境中含量极低的气味相关的物质并迅速作出相应的行为反应,这
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嗅觉系统在昆虫的生存和繁殖中起着非常重要的作用,昆虫对气味的感知极其灵敏和有选择性,这使得昆虫可以探测到环境中含量极低的气味相关的物质并迅速作出相应的行为反应,这包括寻找食物源、栖息场所、交配、产卵和躲避天敌等。气味结合蛋白对气味分子的识别和结合是昆虫嗅觉反应的第一步,在昆虫嗅觉过程中有极其重要的作用。到今天为止,有关华山松大小蠹气味结合蛋白的研究还未见报道,因此研究华山松大小蠹气味结合蛋白及其对寄主挥发性物质和小蠹虫信息素的识别机制具有非常重要的意义。本文对华山松大小蠹触角内气味结合蛋白进行了研究,主要结果如下:1、克隆了华山松大小蠹β-肌动蛋白基因,构建了 β-肌动蛋白的系统发育树;内参基因的可行性分析,结果表明华山松大小蠹β-肌动蛋白基因表达稳定可用作定量PCR的内参基因。2、克隆到1个华山松大小蠹气味结合蛋白基因,它属于PBP-GOBP家族成员,命名为DarmOBP1。根据推导的氨基酸序列构建了 DarmOBPl的系统发育树,对蛋白质的理化性质跨膜区预测,DarmOBPl可以编码一个13.54 KD的水溶性的蛋白。3、构建华山松大小蠹DarmOBP1的原核表达载体和诱导表达,诱导条件为:28℃,IPTG浓度1.0mmol/L,诱导时间6h。经SDS-PAGE检测,表达的蛋白大小约为14KD与预测结果相符。
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