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背景变应性鼻炎(AR)是常见呼吸道变应性疾病,属中医鼻鼽范畴。学界发现肠道菌群通过Th17/Treg影响变应性疾病的发生发展。前期研究证实麻黄附子细辛汤(MFXD)可回调Th1/Th2平衡治疗阳虚AR,但其对肠道菌群及Th17/Treg的作用机制尚不明确。目的阐明MFXD对阳虚AR大鼠肠道菌群的影响及调节Th17/Treg的机制,明确大鼠鼻黏膜与肠黏膜变化的相关机制;分析汤剂化学成分及其治疗AR的分子机制,通过以上研究为MFXD临床应用及新药开发提供依据。方法1、建立阳虚AR大鼠病证结合模型,通过HE染色、ELISA、流式细胞术和qRT-PCR等检测AR及Th17/Treg平衡的相关指标。2、通过16S rDNA技术检测肠道菌群结构,PICRUSt进行功能预测;GC-MS/MS检测粪便中短链脂肪酸含量。3、通过HE染色和免疫组化分析黏膜上皮组织和细胞改变;免疫荧光检测黏膜P物质含量。4、LC-MS/MS结合网络药理学分析汤剂成分及其治疗AR的分子机制。结果1、MFXD显著降低阳虚AR大鼠鼻炎症状得分、IgE和组胺含量,降低血清IL-17含量、外周血CD4+IL-17+Th17细胞数、鼻黏膜RORyt的mRNA表达,升高IL-10含量、外周血CD25+Foxp3+Treg细胞数、鼻黏膜Foxp3的mRNA表达。2、MFXD回调阳虚AR大鼠肠道菌群α-多样性,增加厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门丰度,降低放线菌门、蓝细菌门丰度;增加Anaerotruncus,Bacteroides,Bifidobacterium,Butyricicoccus,Lachnospiraceae,Ruminococcaceae 和Prevotellaceae 含量,降低 Enterococcus 和Erysipelotrichaceae 含量。PICRUSt 表明组间差异菌涉及新陈代谢、遗传信息处理、环境信息处理、细胞调控、人类疾病和有机体系统。MFXD可增加膜转运、能量代谢、核酸代谢、细胞运动、酶家族、信号转导、环境适应等功能,降低消化和排泄功能。此外,MFXD增加粪便中SCFAs含量,尤其是丁酸。3、MFXD修复鼻黏膜和肠黏膜上皮组织和细胞损伤,减轻炎症细胞浸润,增加occludin、claudin-1和ZO-1蛋白表达,降低P物质水平。丁酸盐能修复黏膜损伤,降低P物质水平。4、鉴定出MFXD汤剂中24种成分,涉及37个AR疾病靶点。贡献度前10成分为槲皮素、伪麻黄碱、麻黄碱、β-细辛醚、甲基麻黄碱、亚麻酸、去甲麻黄碱、阿魏酸、甘松新酮和去甲乌药碱。GO注释发现MFXD成分富集于质膜、细胞表面、细胞膜等细胞成分,参与药物结合、酶结合、受体活性等分子功能,涉及炎症反应、脂代谢等生物过程。KEGG通路富集于Fc-epsilon-RI/B cell receptor/NF-κB signaling pathway 等免疫、炎症通路及 PI3K/AKT、HIF-1、cAMP和AMPK signaling pathway等能量代谢通路,提示方药成分作用的靶点通路与机体免疫调节及能量代谢相关。结论1、MFXD可调整阳虚AR大鼠肠道菌群结构及SCFAs含量,影响Th17/Treg平衡。2、鼻黏膜和肠黏膜相关联,在病理变化上具同步性,P物质可能是其中介物质。3、MFXD汤剂中化学成分作用于多条炎症、免疫及能量代谢通路,具有协同增效的配伍特点。