【摘 要】
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硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)是一种小分子量的氧化还原蛋白,广泛分布于所有生物体中。Trx具有多种生物学功能,在包括基因转录调控和免疫应答等多种生物过程中发挥着重要作用
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硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)是一种小分子量的氧化还原蛋白,广泛分布于所有生物体中。Trx具有多种生物学功能,在包括基因转录调控和免疫应答等多种生物过程中发挥着重要作用。迄今为止,有关鱼类Trx功能研究的报道较少。在本研究中,我们克隆、鉴定分析了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis) Trx基因(命名为CsTrx1),并分析了其功能。序列分析表明,CsTrx1由107个氨基酸组成,与其它的硬骨鱼类有54.1-60.8%的同源性。CsTrx1含有一个高度保守的结构CXXC (CQPC),该结构在哺乳动物中是Trx的活性位点。实时荧光定量PCR分析表明,CsTrx1的表达在肝脏中最高,并在细菌侵染和铁、铜及过氧化氢刺激情况下显著上调。纯化的重组CsTrx1蛋白(rCsTrx1)具有胰岛素二硫键还原酶活性和抗氧化功能,但是当我们把功能区CQPC中的两个半胱氨酸同时突变为丝氨酸时,上述功能则完全丧失。进一步研究发现rCsTrx1能促进半滑舌鳎头肾白细胞的增殖,激活免疫基因的表达,增强白细胞抵抗致病细菌侵染的能力。总之,研究结果表明,CsTrx1具有依赖于CXXC结构的生物学还原酶活性和抗氧化活性,并对免疫相关的细胞因子具有调控作用,说明CsTrx1在保护细胞抵抗由氧化环境刺激和病原菌侵染所造成的氧化胁迫中具有重要作用。
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