【摘 要】
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背景：B7-H1是辅助免疫调节分子B7大家族中的一个，B7家族被熟知为对周围系统免疫调节起着重要作用。最近，新发现B7家族的新成员—B7-H4，发现其对肿瘤细胞特异性T细胞有抑制作用。
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背景：B7-H1是辅助免疫调节分子B7大家族中的一个，B7家族被熟知为对周围系统免疫调节起着重要作用。最近，新发现B7家族的新成员—B7-H4，发现其对肿瘤细胞特异性T细胞有抑制作用。同时通过口腔投入抗原的研究中发现：机体再次遭遇此同种抗原时免疫力明显下降。前者是免疫调节中起重要作用的因子，后者在动物实验和临床治疗中易行且被广泛应用。对于移植排斥反应，自身免疫性疾病等需要通过降低机体免疫力来治疗的疾病中此类联合应用治疗手段已经成为降低免疫治疗领域中的热点。目的：1)用树枝状细胞株—DC2.4诱导对同种抗原的口服免疫耐受；2)检测B7-H1，B7-H4在诱导口服免疫宽容中的作用；3)检测有免疫调节作用的细胞变化；探讨它们在调节机体免疫中的作用和关系。方法：1)给BALB／C(H-2d)小鼠每天喂食树枝状细胞株—DC2.4(H-2b)，诱导对同种抗原的免疫耐受；2)通过静脉动力进样(hydrodynamic injection)B7-El或B7-H4 DNA，并利用酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ELISA)检测其在血液中分泌的B7-H1或B7-H4蛋白质的量；3)通过检测延迟过敏反应(DTH)和单向混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction，MLR)来检测机体免疫力的变化；4)分离脾细胞，肠系膜淋巴细胞等免疫细胞，进行流式染色，检测细胞群的变化；5)采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)，比较B7-H1，B7-H4注射组和对照组中分别分离免疫细胞，并扩增免疫细胞中的FoxP3基因，并以核基因组的GAPDH作为定量标准物，比较FoxP3基因的表达差异。结果：1)给BALB／C(H-2d)小鼠每天喂食树枝状细胞株—DC2.4(H-2b)，诱导出了对同种异型抗原的免疫耐受(P＜0.01)；2)喂食DC2.4同时注射B7-H1或B7-H4 DNA的群体比较对照组延迟过敏反应明显降低(P＜0.05)，从注射B7-H1或B7-H4 DNA的群体中分离的免疫细胞做的单向混合淋巴细胞反应明显降低(P＜0.05)；3)IFN-γ，IL-5，TNF-α表达水平明显减低(P＜0.05)；4)CD4+CD25+FoxP3+免疫调节T细胞在CD4+细胞群中的百分比明显增高(P＜0.05)；5)CD4+细胞中FoxP3基因的表达对比比较组明显增高(P＜0.05)。结论：1)给予BALB／C小鼠口腔投入树枝状细胞株—DC2.4，可诱导对同种抗原的口服免疫宽容。2)B7-H1，B7-H4在诱导口服免疫宽容中有增强作用。3)用DC2.4诱导免疫宽容并注射B7-H1，B7-H4 plasmid DNA的群体中分离的脾细胞和肠系膜淋巴细胞的增殖能力比较对比组中分离的细胞明显下降。4)B7-H1，B7-H4在诱导口服免疫宽容中的增强作用可能与其对Th1和Th2细胞因子的分泌减少和产生较多的CD4+CD25+FoxP3+免疫调节T细胞有关。
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