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番茄(Solanum lycopersicum L.)是典型的非冷驯化植物,在其生长发育的每个阶段都容易受到低温的伤害。尤其是采后的番茄果实在低温储藏过程中易出现冷害症状。但是温度如何通过改变钙离子信号影响采后番茄抗冷能力的作用机制还了解甚少。类钙调素(Calmodulin-like,CML)是植物特有的一类Ca2+感受蛋白,它们可通过感受细胞内Ca2+浓度的变化,对各种胁迫产生响应,来调节植物生长发育的过程。通过前期研究筛选到一个编码类钙调素的基因SlCML19在番茄成熟期表达量较高而在低温贮藏过程中表达量急剧下降,推测其与果实冷害反应密切相关。
论文主要研究成果如下:
1SlCML19基因(番茄数据库编号为:Solyc02g094000)位于2号染色体上,cDNA序列全长为426bp,含一个外显子,编码的蛋白质长度为141个氨基酸,有4个EF手性单元结构域;
2通过已有的数据比较分析番茄、水稻和拟南芥类钙调素家族和钙调素家族的同源关系,结果显示番茄SlCML19与水稻和拟南芥类钙调素家族的一些成员存在较近的亲缘性;
3通过启动子区域功能分析发现,SlCML19的启动子区域含有光响应、激素响应、胁迫响应等相关作用的元件;
4通过在线软件和qRT-PCR分析了SlCML19的组织表达模式,结果一致表明SlCML19的表达具有组织特异性,在根和果实中的表达量较高,其中在果实成熟阶段,熟果期的表达量最高。在线软件预测SlCML19在细胞中的表达部位是细胞质;
5获得过表达SlCML19基因的番茄转基因材料(SlCML19-OE)。采收T2代株系绿熟期的果实,进行冷藏处理后,发现果实的冷害症状明显减轻。初步判断SlCML19参与果实采后抗冷调控的过程;
6通过对采后绿熟期果实进行冷藏处理,测定其生理指标,推测SlCML19可以通过增强CAT的活性来降低H2O2的含量,从而减弱膜脂的过氧化作用,降低细胞膜的受低温损伤程度;
7通过酵母双杂交进行番茄cDNA筛库,筛选出互作的SlUMP1蛋白,推测SlCML19蛋白会通过与SlUMP1蛋白互作来提高番茄果实采后的抗冷;
本研究结论为番茄SlCML19基因能够通过增强CAT酶得活性来降低由低温产生的活性氧,进而减轻膜脂的过氧化作用,降低细胞膜受到低温伤害的程度。同时SlCML19蛋白可能会与SlUMP1蛋白互作来提高番茄果实采后的抗冷。可为揭示采后番茄果实响应低温胁迫分子机制奠定基础,为低温贮藏控制采后番茄果实品质提供参考。
论文主要研究成果如下:
1SlCML19基因(番茄数据库编号为:Solyc02g094000)位于2号染色体上,cDNA序列全长为426bp,含一个外显子,编码的蛋白质长度为141个氨基酸,有4个EF手性单元结构域;
2通过已有的数据比较分析番茄、水稻和拟南芥类钙调素家族和钙调素家族的同源关系,结果显示番茄SlCML19与水稻和拟南芥类钙调素家族的一些成员存在较近的亲缘性;
3通过启动子区域功能分析发现,SlCML19的启动子区域含有光响应、激素响应、胁迫响应等相关作用的元件;
4通过在线软件和qRT-PCR分析了SlCML19的组织表达模式,结果一致表明SlCML19的表达具有组织特异性,在根和果实中的表达量较高,其中在果实成熟阶段,熟果期的表达量最高。在线软件预测SlCML19在细胞中的表达部位是细胞质;
5获得过表达SlCML19基因的番茄转基因材料(SlCML19-OE)。采收T2代株系绿熟期的果实,进行冷藏处理后,发现果实的冷害症状明显减轻。初步判断SlCML19参与果实采后抗冷调控的过程;
6通过对采后绿熟期果实进行冷藏处理,测定其生理指标,推测SlCML19可以通过增强CAT的活性来降低H2O2的含量,从而减弱膜脂的过氧化作用,降低细胞膜的受低温损伤程度;
7通过酵母双杂交进行番茄cDNA筛库,筛选出互作的SlUMP1蛋白,推测SlCML19蛋白会通过与SlUMP1蛋白互作来提高番茄果实采后的抗冷;
本研究结论为番茄SlCML19基因能够通过增强CAT酶得活性来降低由低温产生的活性氧,进而减轻膜脂的过氧化作用,降低细胞膜受到低温伤害的程度。同时SlCML19蛋白可能会与SlUMP1蛋白互作来提高番茄果实采后的抗冷。可为揭示采后番茄果实响应低温胁迫分子机制奠定基础,为低温贮藏控制采后番茄果实品质提供参考。