Bacillus sp. 16A苎麻脱胶机制初步研究及其关键酶的纯化

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:minloveyou
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
与热碱蒸煮的化学脱胶工艺相比,生物脱胶技术具有很大的优越性和良好的应用前景。目前的技术难点是如何进一步降低脱胶后纤维的残胶率:一味增加脱胶关键酶——果胶酶并不能持续增强脱胶效果;人们对半纤维素酶在脱胶中的作用存在分歧。本论文的目的就是研究后者是否对果胶酶有脱胶增效作用。 从实验室保存的脱胶菌中筛选出一株苎麻脱胶能力强的菌株Bacillus sp.16A,同比于其它相关报道,经该菌株脱胶的苎麻残胶率在14%以下,而且在4h内即可完成脱胶,证明它是一个高效脱胶菌株。 Bacillus sp.16A经16s rDNA序列比对和Biolog Microbial Identification System鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。胞外酶系分析显示,Bacillus subtilis 16A能够分泌高活性的聚半乳糖醛酸酶和少量的半纤维素酶,不产生纤维素酶。在其高效脱胶的同时并不会损伤纤维,是苎麻脱胶的优良菌株。 利用丙酮分级沉淀的方法,将Bacillus subtilis 16A发酵液中的果胶酶和甘露聚糖酶处理成不同活性比例的3组脱胶酶液。分别进行苎麻脱胶后分析了纤维的一些特征,包括:手感柔软程度、纤维分散程度、果胶残留、失重率、纤维细度及扫描电镜图。通过比较发现,甘露聚糖酶对果胶酶的脱胶效果有一定的协同作用,前者能增强后者的脱胶效果。这给进一步研究苎麻脱胶指明了方向:为了进一步提高脱胶效果,应该把工作重心放在提高半纤维素酶的活性上来。 最后,为进一步深入研究苎麻的脱胶机制作准备,纯化了脱胶关键因子——果胶酶。粗酶液经预冷丙酮沉淀、CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析、真空冷冻干燥、Sephadex G-75凝胶过滤层析后,经SDS-PAGE不连续电泳检测为单一条带,分子量为30.2kD。总共被浓缩了21.8倍,回收率17.7%。基本性质分析表明:该酶最适作用pH为9.0,在中性pH(6.0-8.0)范围内稳定,pH>9.0时易失活;最适作用温度为50℃,在<55℃时稳定,>60℃时易失活;Ca2+、Mg2+是该酶的激活剂,其中Ca2+对该酶有强激活作用,Cu2+、Mn2+、Co2+、Hg2+是抑制剂,其中Hg2+对该酶的抑制作用最大;酶解产物在235nm处有强吸收峰,说明该酶是聚半乳糖醛酸裂解酶,且只具有裂解聚半乳糖醛酸的能力。
其他文献
家庭和学校是青少年成长和发展中的两个主要场域,学校教育的组织性、目的性和系统性与家庭教育的非正式性、灵活性相互补,二者相互合作共同作用于孩子的成长发展,家校合作具有必然性。目前,各个国家、各个地区都高度关注家校合作,然而城市与农村家长参与家校合作的情况是不相同的。相对于城市,农村家长教育能力相对较弱,而通过家校合作让农村家长走进学校、了解学校,能提高家长的教育能力,因此,农村在某种意义上更需要家校
小说是叙事的艺术,作家如何叙事决定着小说在艺术创作上的所长和特色,每个作家都有自己的特点,作家的特点决定了小说的框架和格局。获第六届茅盾文学奖的《东藏记》是作家宗
为探索烟叶发酵过程中添加生物酶制剂以降解烟叶中淀粉和蛋白质的可行性,本文进行了大量正交设计试验,并利用生物技术的有效手段筛选菌株用于发酵烟叶(丝),试验结果如下: 1
在陆游的家训诗中,借代形成了一个个具体的、个别的或特殊的借体代码,把抽象的、整体的或一般的本体进行了解读编译,组建出了一个便于识别、理解和传播的文学意向系统。在刻
改革开放以来,随着以市场化为目标取向的经济体制改革的深入和社会主义法治的恢复与发展,中国民法学在服务于改革实践的过程中,不仅获得了繁荣发展,而且也逐渐实现着自身的理
本文通过各种层析技术及现代波谱学解析化合物结构的手段研究了常用中药升麻(Cimicifnga foetida L.)和兴安升麻[C.dahurica (Turcz.)Maxim.]根茎的化学成分,并初步探讨了升麻族植
在目前家用小汽车的购买量日益增长、停车拥挤、车位使用昂贵的背景下,立体车库是解决泊车困难的很好选择。本文设计了升降横移式立体车库控制器,并对立体车库的车位调度算法
本文总结了几种常见类型的张拉膜建筑室内空间的特点,鉴于膜屋顶承载时允许较大变形且膜材呈半透明的性质,又讨论了这种建筑的室内分隔墙设计和室内光照等的特殊要求,介绍了
养老保险是社会保险制度最重要、最核心的内容。我国的养老保险是由国家基本养老保险、企业补充养老保险和个人储蓄性养老保险共同组成的多层次的养老保险体系,其中国家基本
众所周知,近几年以来我们国家的发展异常迅猛,各行各业都取得了较为长足的进步,其中道路交通建设方面的发展尤为突出。不过,虽然道路桥梁方面的建设发展速度颇为快速,但其中