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目的:通过运用关联分析及聚类分析对李跃华教授辨证论治骨质疏松患者的方剂进行回顾性研究以挖掘出李教授辨证论治的基础方剂、常用药对/队,总结相关用药经验,指导临床用药。将文本数据挖掘得到的劲骨坚系列方的基础方剂通过系统药理学策略进行分析并阐述其干预骨质疏松症的机制,以明确发挥作用的分子生物学机制。方法:数据来源于2016年1月至2019年2月李跃华教授于中国中医科学院西苑医院老年科门诊诊治的骨质疏松症患者,共2958诊次,对患者基线资料进行统计,同时采集方药信息。通过对数据进行整理和筛查,利用Office建立患者基本信息及中药处方的数据库,并通过IBM SPSS Statistic 25.0及SPSS Modeler 18.0对建立的数据库进行患者一般资料统计、聚类分析和干预药物药对/队关联规则分析。通过系统药理学数据库TCMSP和Scifinder化学数据库构建劲骨坚进入人体吸收的药代动力学模拟参数,发掘劲骨坚中发挥药效的活性成分,通过PharmMapper药效团数据库对活性成分进行潜在靶标的预测,通过疾病基因数据库OMIM/Genecards收集骨质疏松症的基因,通过HPRD,IntAct,STING,Cytoscape数据库构建活性成分-靶点网络,劲骨坚活性成分靶点-骨质疏松靶点PPI网络,通过Cytoscape相关插件如MODE和ClueGO进行网络拓扑学构建和分析,利用Enrichment Map和DAVID数据库进行富集分析和生物过程分析可视化。结果:1.从骨质疏松症的中医证型分布来看,辨证属肝肾亏虚证,有531诊次,占比17.95%;辨证属脾肾两虚证,有840诊次,占比28.40%;辨证属脾肾两虚兼血瘀证,有1587诊次,占比53.65%,可见本次纳入病历以肝肾亏虚证、脾肾两虚证、脾肾两虚兼血瘀证为主要证型。因纳入病历全部来源于老年科门诊,以中老年人为主,因此仅反映中老年群体的骨质疏松症中医证型的分布特征。2.通过分类聚类和关联规则统计发现,肝肾亏虚证中常以基础药队川芎-烫骨碎补/盐杜仲补肾强骨,行气活血;以酒萸肉-桑葚药对滋补肝肾,阴阳互济。脾肾两虚证中以基础药队川芎-烫骨碎补/盐杜仲/盐补骨脂补肾强骨,行气活血;以党参-生黄芪或山药-麸炒白术健脾益气,补运同施。脾肾两虚兼血瘀证中以基础药队川芎-烫骨碎补/盐杜仲/盐补骨脂补肾强骨,行气活血;以牛膝-川牛膝活血逐淤,通利关节。3.通过聚类分析,结合临床实际,明确骨质疏松症3个证型基础方剂的药物组成为:①肝肾亏虚-劲骨坚1号方:烫骨碎补、盐杜仲、生地黄、酒萸肉、川牛膝、牛膝、川芎、生黄芪、党参、麸炒白术、茯苓、桑葚。②脾肾两虚证-劲骨坚2号方:烫骨碎补、盐补骨脂、盐杜仲、细辛、川芎、生黄芪、党参、麸炒白术、煨肉豆蔻、山药。③脾肾两虚兼血瘀证-劲骨坚3号方:烫骨碎补、盐杜仲、盐补骨脂、川牛膝、牛膝、生地黄、细辛、制川乌、制草乌、麸炒白术、当归、川芎、醋乳香、姜黄。4.综合分析劲骨坚1-3号方,并结合2958张处方的药味频数统计,经李跃华教授确认,明确劲骨坚系列方的基础方剂为盐补骨脂、盐杜仲、烫骨碎补、生黄芪、党参、川芎、川牛膝、牛膝。5.通过系统药理学对劲骨坚系列方的基础方剂干预骨质疏松进行网络构建和分析:（1）活性成分-靶点目标网络;（2）劲骨坚-骨质疏松症PPI网络。劲骨坚-骨质疏松症网络中核心的中心靶点主要是ALB（293个边）、IGF1（196个边）、MAPK1（191个边）、SRC（183个边）、ESR1（171个边）;MODE的网络拓扑学分析了劲骨坚调控骨质疏松症的子簇生物过程,通过对子簇的相关生物学过程和信号通路进行富集分析得到劲骨坚干预骨质疏松的机制主要有细胞凋亡负调控,雌激素介导的生物过程,细胞外基质的合成,成纤维细胞的增殖,成骨细胞和破骨细胞分化等相关生物学过程;信号通路富集分析显示其可以调控的前10的信号通路有催乳素信号通路、PI3K-Akt信号通路、FoxO信号通路、Ras信号通路、雌激素信号通路、破骨细胞分化、MAPK信号通路、卵巢类固醇生成、VEGF信号通路、PPAR信号通路。结论:1.通过临床实践李跃华教授按病程进展将骨质疏松症的证型分为肝肾亏虚、脾肾两虚、脾肾两虚兼血瘀3种,其中脾肾两虚兼血瘀患者在老年科门诊较多。老年人随着脏腑虚损程度的加重以及病程的进展,从单纯肾虚到脾肾两虚逐步发展为脾肾两虚兼血瘀,此阶段患者病性虚实夹杂,病程久,病情重。2.临床中李跃华教授治疗骨质疏松症,常用基础药队川芎-烫骨碎补/盐杜仲/烫补骨脂,强调补肾强骨与行气活血二法并重;在此基础上:肝肾亏虚证中常用酒萸肉-桑葚药对滋补肝肾,阴阳互济;此外,临床中肝肾亏虚证骨质疏松患者,偏于阳虚者常加淫羊藿-仙茅以温肾阳;抽筋严重者常加白芍-炙甘草或伸筋草-透骨草,以从肌肉到骨骼,通解透达,舒缓筋脉。脾肾两虚证中常用党参-生黄芪或山药-麸炒白术健脾益气,补运同施;此外,临床中脾肾两虚证骨质疏松患者,五更泻者常合用煨肉豆蔻-盐补骨脂-酒萸肉,取四神丸之意,以温肾散寒,涩肠止泻;脘痞腹胀者加木香-砂仁-沉香以行气温中。脾肾两虚兼血瘀证中常用牛膝-川牛膝活血逐淤,通利关节;此外,临床中脾肾两虚兼血瘀骨质疏松患者,常根据其瘀血严重程度,辨证选用当归-川芎-醋乳香或姜黄-三棱-莪术养血益气,活血/破血止痛;骨折患者加续断-狗脊补肝肾,强筋骨,续折伤。3.通过数据挖掘,验证李跃华教授干预骨质疏松症3个证型的基础方剂:①肝肾亏虚-劲骨坚1号方,药物组成为:烫骨碎补、盐杜仲、生地黄、酒萸肉、桑葚、川牛膝、牛膝、川芎、生黄芪、党参、麸炒白术、茯苓,以补肾填精,强筋健骨;劲骨坚1号方注重补肾阴。②脾肾两虚证-劲骨坚2号方,药物组成为:烫骨碎补、盐补骨脂、盐杜仲、川芎、生黄芪、党参、麸炒白术、煨肉豆蔻、山药,以补肾壮骨,益气健脾;劲骨坚2号方注重健脾。③脾肾两虚兼血瘀证-劲骨坚3号方,药物组成为:烫骨碎补、盐杜仲、盐补骨脂、川牛膝、牛膝、生地黄、细辛、制川乌、制草乌、麸炒白术、当归、川芎、醋乳香、姜黄,以补肾健脾,活血止痛;劲骨坚3号方注重活血止痛。4.综合分析劲骨坚1-3号方,并结合2958张处方的药味频数统计,经李跃华教授确认,明确劲骨坚系列方的基础方剂为盐补骨脂、盐杜仲、烫骨碎补、生黄芪、党参、川芎、川牛膝、牛膝。方中烫骨碎补、盐杜仲、盐补骨脂,补肝肾,强筋骨,共为君药;生黄芪、党参健脾益气,补后天以资先天,充精气津液之化源,共为臣药;川牛膝、牛膝既可活血通经,又能加强补肝肾、强筋骨的功效,共为佐药;川芎行气活血止痛,疏通骨质营养通路,载药以通络达骨骼,提供骨骼营养物质,复骨生发之机,使全方补中有行,补而不滞,为使药。5.通过系统药理学分析,得出劲骨坚基础方剂可以通过干预骨代谢相关的多生物学过程和多信号传导途径来达到治疗骨质疏松症效果,为临床应用和进一步开发新药提供了理论基础。