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目的:肝缺血再灌注损伤（HIRI）的主要特征为炎症反应,深入了解并探索炎症反应的机制对缺血再灌注损伤治疗策略的制定极为重要。在本研究中,我们旨在阐明转录因子YY1在HIRI中的作用以及转录因子YY1介导的micro RNA（mi R）-181a-5p/雌激素受体α（ESR1）/氨酸激酶受体2（ERBB2,HER2/NEU）信号轴在HIRI中的机制。方法:第一部分:为了明确YY1、mi R-181a-5p在体内对肝缺血再灌注损伤的作用及上游调控机制,首先利用UCSC数据库检索mi R-181a-5p的启动子序列,然后采用h TFtarget和ALGGEN数据库对mi R-181a-5p的上游调控转录因子进行预测;然后,我们成功构建了小鼠HIRI动物模型。采用HE染色检测肝组织形态改变并进行病理学评分、比色法检测肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）及谷草转氨酶（AST）水平。ELISA法检测肝I/RI模型血清中肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor,TNF-α）、白细胞介素（Interleukin,IL）-1β及IL-6含量水平;通过免疫组化、q RT-PCR来验证I/RI小鼠肝组织中YY1和mi R-181a-5p的表达。构建YY1过表达慢病毒（YY1-oe）,并建立了缺氧/复氧（H/R）诱导再灌注损伤的AML12细胞模型。ELISA法测定正常组及H/R处理的AML12细胞上清中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平,比色法检测ALT和AST水平;通过q RT-PCR,免疫印迹（western blot）以及双荧光素酶报告基因对YY1、mi R-181a-5p的表达及其与YY1、mi R-181a-5p的靶向性关系进行验证;通过应用流式细胞术和western blot检测了H/R诱导的肝细胞模型中细胞凋亡和凋亡相关蛋白Bax和bcl-2的表达。第二部分:为了探索了mi R-181a-5p在H/R诱导的肝细胞损伤中的下游机制,通过JASPAR数据库预测了YY1基因在mi R-181a-5p启动子区域的结合位点,并通过生物信息学分析mi R-181a-5p的候选靶基因。然后,通过采用免疫组化和western blot方法检测mi R-181a-5p靶基因在HIRI小鼠的肝组织中的表达;利用双荧光素酶报告基因和q RT-PCR对mi R-181a-5p在肝脏I/RI小鼠肝脏组织和H/R诱导的肝细胞模型中的表达以及mi R-181a-5p和YY1的靶向关系进行验证;通过流式细胞术、western blot和ELISA检测mi R-181a-5p抑制剂或联合sh-ESR1处理H/R模型细胞凋亡、肝功能指标以及炎症因子的水平。第三部分:为了验证了ESR1通过调节ERBB2参与HIRI小鼠的推测,通过免疫组化和western blot方法,检测ERBB2在HIRI小鼠的肝组织中的表达;为了探究肝细胞中的ESR1是否能够调节ERBB2,我们检测慢病毒转染的AML12细胞中ESR1和ERBB2的表达;通过q RT-PCR及western blot检测AML12细胞中sh-ESR1的沉默效率和ESR1和ERBB2蛋白表达;流式细胞术、western blot和ELISA检测ESR1过表达慢病毒处理或联合sh-ERBB2处理H/R诱导的细胞模型中细胞凋亡、炎症因子水平。第四部分:我们推测YY1通过mi R-181a-5p/ESR1/ERBB2信号轴调控肝缺血再灌注损伤。为进一步验证,我们在实验中通过q RT-PCR和western blot方法检测不同方法干预分组的小鼠HIRI动物模型肝组织和H/R诱导的细胞模型中YY、mi R-181a-5p、ESR1、ERBB2的表达;通过流式细胞术和TUNEL染色实验检测小鼠肝细胞和肝组织凋亡水平变化;通过western blot检测凋亡相关蛋白（Bax,Bcl-2）的水平;此外,我们还检测了小鼠血清以及肝细胞培养上清液中肝功能指标和炎症因子水平。结果:第一部分:首先利用生物信息学分析出mi R-181a-5p的上游调控转录因子YY1。在HIRI动物模型和H/R诱导的细胞模型中,和对照组相比,实验组HIRI组的肝脏组织缺血、坏死,血清和细胞培养上清液中肝功能指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶和炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1-α水平明显升高,肝组织和肝细胞中YY1的表达显著降低,而mi R-181a-5p的表达水平显著增高。进一步研究YY1对mi R-181a-5p表达调控机制及和对肝细胞功能的影响,实验结果发现:转录因子YY1可以靶向调控mi R-181a-5p,过表达YY1可以抑制mi R-181a-5p的表达,从而减轻缺氧再复氧导致的肝细胞凋亡和炎症反应。第二部分:我们对mi R-181a启动子区域的YY1基因的结合位点进行预测,最终获得79个候选靶基因。随后,对这79个候选靶基因进行互作分析,并构建基因互作网络图,结果发现,ESR1基因的degree值最大,表明其在网络图中处于最为核心的位置。随后,通过Target Scan数据库,获取mi R-181a-5p与ESR1基因的结合位点信息;进一步实验结果显示:HIRI小鼠肝组织与H/R肝细胞模型ESR1表达显著降低,mi R-181a-5p可以靶向抑制肝细胞中ESR1的表达,抑制mi R-181a-5p表达可以提高ESR1表达并减轻缺氧再复氧导致的的肝细胞凋亡增多和炎症水平的增高,而干扰ESR1则可逆转因抑制mi R-181a-5p而引起的作用。第三部分:通过免疫组化,我们发现ERBB2主要定位于小鼠肝细胞的细胞质和细胞膜,HIRI小鼠肝组织与H/R肝细胞模型中ERBB2表达水平均降低。过表达ESR1可以提高ERBB2的表达水平,从而减轻缺氧再复氧导致的肝细胞凋亡和炎症水平,而下调ERBB2则可以逆转过表达ESR1引起的作用。第四部分:过表达YY1的H/R细胞模型中YY1、ESR1和ERBB2表达增加,mi R-181a-5p表达减少;过表达YY1与sh-ERBB2同时处理细胞后,ERBB2表达水平下调。过表达YY1时,AML12细胞的凋亡受到抑制,Bax水平下调,Bcl-2水平上调;过表达YY1与sh-ERBB2同时处理细胞后,得到结果相反;在H/R细胞模型中,YY1过表达引起肝功能指标和炎症因子（TNF-α、IL-6和IL-1β）水平下调;过表达YY1与sh-ERBB2同时处理细胞,引起肝功能指标和炎症因子水平上调。HIRI小鼠肝组织中mi R-181a-5p表达升高,YY1、ESR1和ERBB2表达降低;而过表达YY1后,结果相反。HIRI小鼠肝组织坏死增强,但在YY1过表达时,这种肝损伤明显改善。TUNEL染色实验结果显示,HIRI小鼠肝组织中细胞凋亡加速,而过表达YY1可减少细胞凋亡。结论:YY1通过抑制mi R-181a-5p靶向基因ESR1,激活下游基因ERBB2的表达,从而抑制肝细胞炎症反应和细胞凋亡,进而减轻肝缺血再灌注损伤。