【摘 要】
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背景:结直肠癌是全世界第三大常见的恶性肿瘤,是癌症死亡的第二大常见原因。现代手术技术的发展与化疗和放疗方案在不断改进,但结肠癌患者术后出现复发和转移的患者不在少数。一些天然抗癌活性成分可以用于结肠癌的综合治疗,提高临床疗效。一叶萩碱（Securinine,Sec）又名为一叶碱,是从大戟科植物叶底珠嫩枝叶或根中提取出的主要生物碱。Sec具有兴奋脊髓和脑干中枢神经作用,还可改善造血微环境,促使粒系、红
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背景:结直肠癌是全世界第三大常见的恶性肿瘤,是癌症死亡的第二大常见原因。现代手术技术的发展与化疗和放疗方案在不断改进,但结肠癌患者术后出现复发和转移的患者不在少数。一些天然抗癌活性成分可以用于结肠癌的综合治疗,提高临床疗效。一叶萩碱（Securinine,Sec）又名为一叶碱,是从大戟科植物叶底珠嫩枝叶或根中提取出的主要生物碱。Sec具有兴奋脊髓和脑干中枢神经作用,还可改善造血微环境,促使粒系、红系、巨核系细胞增生等多种药理和临床应用价值,但关于Sec抗肿瘤作用中对消化道肿瘤作用尚无报道。因此本文将从细胞周期及凋亡的角度探讨Sec对结肠癌SW620细胞增殖的影响。目的:探讨Sec对人结肠癌SW620细胞周期和凋亡的影响及其机制。方法:将SW620细胞分为Control组、20μmol/L Sec组、40μmol/L Sec组、80μmol/L Sec组、40μmol/L奥沙利铂（Oxaliplatin,Oxa）组。1.通过CCK8法检测Sec对SW620细胞增殖的影响。2.通过流式细胞术及western blotting法检测Sec对SW620细胞周期的影响。3.通过TUNEL法及流式细胞术检测Sec对SW620细胞凋亡的影响;DCFH-DA法检测细胞ROS水平;JC-1法检测细胞线粒体膜电位;western blotting法检测p53、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP、Bcl-2、Bax、Cytochrome C蛋白表达水平。4.通过western blotting法检测JNK、p-JNK、p38、p-p38、ERK、p-ERK蛋白表达水平。结果:1.与Control组相比,Sec浓度大于20μmol/L时SW620细胞存活率显著降低（P＜0.0001）。2.与Control组相比,Sec各剂量组SW620细胞S期细胞百分率显著升高（P＜0.0001）;G0/G1期及G2/M期细胞百分率显著降低（P＜0.0001）;CDK2、Cyclin A1蛋白表达水平显著上升（P＜0.0001）。3.与Control组相比,Sec各剂量组SW620细胞凋亡率显著升高（P＜0.0001）;细胞ROS水平显著升高（P＜0.0001）;细胞线粒体膜电位显著降低（P＜0.0001）;细胞p53、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP、Bax、Cytochrome C蛋白表达水平显著升高（P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001或P＜0.0001）,Bcl-2蛋白表达水平显著降低（P＜0.0001）。4.与Control组相比,Sec各剂量组SW620细胞p-JNK、p-p38、p-ERK相对蛋白表达水平显著升高（P＜0.0001）。结论:Sec可抑制SW620细胞增殖,使细胞周期阻滞在S期,诱导凋亡线粒体途径,其作用机制可能与MAPKs信号通路的调节有关。
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