利用基因重组技术将干扰素α2b与修饰的29肽蛋白连接，获得干扰素α2b-内皮抑素29肽融合蛋白（interferonα2b-endothelialinhibitorypeptide,以下简写为IFNα2b-29）。IFNα2b-29的干扰素α2b部分能够引起肿瘤细胞凋亡和直接抑制肿瘤细胞生长，内皮抑素29肽部分为天然人内皮抑素N端的活性结构区域加上DRGD序列，具备了血管内皮抑制素抑制血管生成的作用，RGD结构靶向肿瘤部位的作用。鉴于IFNα2b-29体现的抗肿瘤作用，使之成为有效的抗肿瘤候选药物。为满足今后的药理学和毒理学实验的需要，有必要将IFNα2b-29制成稳定，安全，有效的制剂。早期上市的蛋白类药物，通常直接加入人血白蛋白作为处方的保护剂，但是由于白蛋白潜在的病原风险，免疫原性直接干扰药物质量的检测等弊端，人们逐渐选择新的替代品做为蛋白质药物的保护剂。因此，本研究的目的是为IFNα2b-29筛选出满足中试生产需求，无白蛋白的制剂处方，并开发无菌冻干工艺，进行稳定性研究，同时建立相应的质量标准。在IFNα2b-29制剂的处方筛选过程中，通过检测不同pH值的缓冲液在37℃条件下通过电泳检测IFNα2b-29的降解和聚集情况，确定最适pH范围为6.0~7.0。检测在37℃条件下，不同浓度的聚山梨酯80对IFNα2b-29（20mM磷酸盐）的IFNα2b活性、29肽活性、及蛋白浓度的影响，证实加入聚山梨酯80可以有效地阻止IFNα2b-29的活性和蛋白浓度的丢失，加入量确定为0.005%。在确定20mM磷酸盐缓冲液和0.005%聚山梨酯80之后，以人血白蛋白做对照组，选择甘露醇、蔗糖和甘氨酸为筛选组，通过检查各组样品的外观、成型性和复溶时间以及检测在37℃条件下IFNα2b和29肽活性的下降趋势，证实甘露醇与人血白蛋白的保护和赋形的效果基本一致。然后通过考察不同浓度的甘露醇对冻干外观的影响，确定甘露醇含量为2%。在符合GMP条件的车间开发无菌冻干工艺，生产3批中试规模的冻干样品，满足样品稳定性考察的需要，同时为放大生产提供相应的工艺参数。对IFNα2b-29中试样品进行质量分析，包括蛋白质含量、IFNα2b生物学活性、29肽生物学活性、非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、分子筛高效液相法等项目。制定了IFNα2b-29冻干粉针的暂行质量标准。通过检测在25℃条件和2~8℃条件保存的稳定性样品的重要指标来考察IFNα2b-29的稳定性。通过筛选和稳定性考察，最终确定采用磷酸盐缓冲液作为缓冲系统、聚山梨酯80作为表面活性剂、甘露醇作为冻干的保护剂和赋形剂。最优处方成分为0.05mg/ml聚山梨酯80，20mg/ml甘露醇，1.076mg/ml磷酸二氢钠和1.732mg/ml磷酸氢二钠。采用冷冻干燥技术，最大限度的延长了IFNα2b-29的稳定时间，使冻干粉针可以在25℃条件下稳定6个月，2~8℃稳定24个月。本研究确定了IFNα2b-29冻干制剂的处方、工艺、暂行质量标准和稳定性数据，为IFNα2b-29作为候选药物进行的药效学试验、药代学试验和安全性评价提供稳定性保障。