研究背景:脑胶质瘤是颅内最常见的原发性恶性肿瘤,但由于其高度侵袭性及浸润性生物学行为特点,难以实现手术全切,且即使在术后应用放化疗患者依然有很高的复发率及死亡率。因此,我们有待进一步探索高复发率的原因,并寻找新的治疗方法及药物。近年来研究发现,MGMT及耐药相关蛋白在原发及复发胶质瘤中不同程度的表达决定了脑胶质瘤细胞的耐药性,并影响着患者的预后。所以,下调脑胶质瘤MGMT及耐药相关蛋白表达或抑制其活性成为提高替莫唑胺对脑胶质瘤治疗的敏感性及改善患者预后的重要方法之一。水飞蓟宾（Silibinin）是水飞蓟素的主要活性成分,并以其良好的保肝效果长期应用于临床。同时研究表明,水飞蓟宾可通过多种机制对多种肿瘤产生抗肿瘤效应。然而,水飞蓟宾对胶质瘤细胞耐药性的影响还需要进一步研究。目的:对比随机选取的不同病理等级的原发和复发胶质瘤的临床病理标本中MGMT及耐药相关蛋白的表达差异。并采用人U87胶质瘤细胞系为模型来探究水飞蓟宾对胶质瘤细胞的杀伤作用以及对胶质瘤细胞耐药性的影响。方法:1.随机选取8名不同病理等级脑胶质瘤患者,通过Western Blot分析耐药相关蛋白MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB的表达差异。2.随机选取4名原发胶质瘤患者及4名复发胶质瘤患者的肿瘤组织样本,通过Western Blot分析相关耐药蛋白MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB在以上病理标本表达差异。3.体外培养U87及U87耐药细胞,以Western Blotting检测两组细胞耐药相关蛋白MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB的表达差异。并分析水飞蓟宾作用于U87及U87耐药细胞一定时间后,耐药相关蛋白水平的变化。4.Western Blotting分析U87及U87耐药细胞在不同浓度水飞蓟宾作用后耐药相关蛋白MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB的变化。5.使用乳酸脱氢酶释放实验检测水飞蓟宾及替莫唑胺对U87细胞的毒性作用。结果:1.随机选取的临床病理标本中MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB的表达水平随脑胶质瘤级别增高而呈增高趋势。2.随机选取的临床病理标本中相同病理级别的胶质瘤细胞中,复发胶质瘤MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB的表达水平明显高于初发脑胶质瘤。3.体外培养获得人U87TR胶质瘤细胞后测得U87TR细胞中MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB水平明显高于人U87细胞。且人U87及U87TR胶质瘤细胞中MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB水平在加入水飞蓟宾后随着时间的延长而下降。4.人U87及U87TR胶质瘤细胞中MRP1、P-GP以及MGMT、NF-κB水平随加入水飞蓟宾浓度的增加而下降。5.分别单独加入水飞蓟宾及替莫唑胺对U87胶质瘤细胞均有杀伤作用,联合使用水飞蓟宾及替莫唑胺后的U87细胞死亡率更高。结论:1.脑胶质瘤在随着病理等级的增高而呈现耐药性增加的趋势。2.脑胶质瘤在复发后对替莫唑胺的耐药性增强。3.水飞蓟宾可降低脑胶质瘤细胞对替莫唑胺的耐药性。4.联合使用水飞蓟宾及替莫唑胺较单用两种药物对胶质瘤细胞杀伤作用更强。