神经干细胞外泌体对大鼠脊髓损伤修复效果的研究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sky_ywt_2001
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目的:研究神经干细胞外泌体对于大鼠脊髓损伤的修复效果。方法:首先,利用超速离心法提取培养细胞上清液中的外泌体,并在透射电子显微镜下进行观察,同时使用A280法测定其浓度。其次,随机将25只实验大鼠分为假手术组,脊髓损伤模型组,甲强龙治疗组,外泌体治疗组,外泌体联合甲强龙治疗组,每组5只。其中假手术组切除椎板后不做特殊处置,其余四组使用击打法在T10部位制备脊髓损伤模型。造模后1 h,除假手术组外,甲强龙治疗组经尾静脉注射给予甲强龙溶液(30 mg/kg,40 mg/ml),外泌体治疗组给予100μL神经干细胞外泌体溶液(105μg/ml),外泌体联合甲强龙治疗组给予100μL的外泌体及适量甲强龙溶液;损伤模型组则给予100μL的0.9%氯化钠溶液。术后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d参照BBB评分标准评定五组实验大鼠后肢运动功能变化情况并记录。21 d后,切取损伤部位1.5 cm长度脊髓,制备成5μm石蜡切片,进而通过HE染色及Nissl染色法观察不同组间脊髓组织形态及神经元结构及数量的变化。结果:神经干细胞外泌体在透射电镜下呈现为特征性的茶杯托形状。造模后不同时刻的BBB评分发现,假手术组各时间段评分无较大波动,其余四组评分均随着时间的延伸有着不同程度的升高,后肢运动功能逐渐恢复。其中甲强龙治疗组及外泌体治疗组评分数值明显高于损伤模型组(P<0.05),且外泌体组评分还略强于甲强龙组(P>0.05)。再者,外泌体联合甲强龙治疗组与单独甲强龙组及外泌体组相比,评分变化更为明显(P<0.05)。21 d后,相应脊髓组织切片经HE染色及Nissl染色后显示出,假手术组脊髓组织排列规整,无异常表现,且被染成蓝紫色的神经元尼氏体较多,清楚可辨。然损伤模型组则表现为脊髓组织排列紊乱,灰白质结构受损,神经元数量明显减少,且胞质内有大量炎症细胞浸润。而治疗组在给予甲强龙或外泌体后,脊髓组织形态以及神经元数目均有不同程度的改观。此外,外泌体与甲强龙联合使用相较单独应用来看,其结果显示为脊髓组织形态更为规整,炎症细胞数量更少,神经元数量更多(P<0.05)。结论:研究表明,神经干细胞外泌体或甲强龙均能够在不同程度上促进大鼠脊髓损伤后脊髓组织的修复,降低炎症细胞数量,保护神经元,进而使其运动功能得以恢复。并且联合应用外泌体与甲强龙相较于每种单独应用,其治疗效果更佳。总体而言,联合使用神经干细胞外泌体与甲强龙可成为针对脊髓损伤的一种更为新颖的治疗策略。
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