蜡样芽孢杆菌是动物微生态制剂最常用的菌种之一,研究其药物耐受现象对于了解益生芽孢菌类微生态制剂的药物耐受现象有重要意义。本实验从市场销售的动物微生态制剂产品中分离得到蜡样芽孢杆菌,并利用K-B法对其进行7类54种抗菌药物的敏感性检测,测试蜡样芽孢杆菌对抗生素药物的耐受情况。按照NCCLS规定的方法对实验所得的22株蜡样芽孢杆菌进行MIC测定;并采用MIC倍倍增加的方法对其中2株敏感菌株和1株标准菌株进行体外氟喹诺酮类药物耐药性诱导;分析蜡样芽孢杆菌耐药性诱导前后菌株gyrA基因和parC基因的变化,初步研究其耐药性的产生过程。22株蜡样芽孢杆菌药敏测试结果显示,蜡样芽孢杆菌对氟喹诺酮类药物最敏感。因此利用氟喹诺酮类药物环丙沙星对2株敏感菌株和1株标准菌株进行体外耐药性诱导试验,根据压力选择变化使其产生对环丙沙星的耐受性;通过克隆受试菌株的gyrA基因和parC基因并进行比较。一共得到3个有意义的基因突变位点。说明蜡样芽孢杆菌的氟喹诺酮类药物的耐受性产生与此相关。利用间-氯苯腙羰基氰化物(CCCP)结合荧光分光光度法检测蜡样芽孢杆菌的氟喹诺酮外输情况,用物理学的方法证实蜡样芽孢杆菌的药物外输作用,为今后的研究蜡样芽孢杆菌的多药外输机制奠定了基础。