第一部分研究目的:探究水平离心富血小板纤维蛋白（PRF）的抑菌作用材料与方法:通过水平离心和固定角度离心分别制备水平离心富血小板纤维蛋白（H-PRF）和富白细胞-血小板纤维蛋白（L-PRF）。然后将其与金黄色葡萄球菌（S.aureus）和大肠杆菌（E.coli）共培养,菌落形成单位计数法检测其抑菌能力;然后将其压制成膜,并放置在平板上,检测膜抑菌圈;然后将PRF分割成5段,分别检测其固体和液体成分的抑菌能力;最后对PRF的细胞进行流式细胞术检测。结果:H-PRF和L-PRF的重量未见明显差异,但菌落形成单位计数法显示H-PRF具有更好的抑菌性能;抑菌圈实验也显示出H-PRF具有更优异的抑菌能力;此外,分段挤压后的固体和液体成分均显示出更好的抗E.coli能力;流式细胞术结果表明H-PRF含有更多的免疫细胞,且分布更为均匀。结论:H-PRF与L-PRF相比具有更强的抑菌能力,不仅因为其含有更多的免疫细胞,也因为其含有的液体成分具有更强的抑菌能力。第二部分研究目的:探究注射型PRF（i-PRF）对于炎症反应的调控作用材料与方法:首先使用低速离心技术得到i-PRF,并使用SEM检测其形貌。然后使用剪刀在大鼠腓肠肌造成5mm深肌肉缺损,分别在缺损处植入明胶海绵+金葡菌（GS+SA）和明胶海绵+金葡菌+i-PRF（GS+SA+i-PRF）。三天后取材,通过组织学手段检测树突状细胞和巨噬细胞的变化。在体外实验中,分别通过巨噬细胞细胞系RAW264.7和树突状细胞DC2.4在脂多糖（LPS）刺激下与i-PRF共培养三天,然后进行RT-PCR和Western blot实验,分别检测RAW264.7炎症极化和DC2.4的成熟标志物表达情况。结果:H＆E染色显示i-PRF可以显著减少肌肉缺损周围的炎症细胞浸润。免疫组织化学染色发现i-PRF处理后缺损处的CD11b+细胞显著减少,提示中性粒和巨噬细胞等炎症细胞的减少。免疫荧光染色表明,i-PRF可以降低巨噬细胞M1极化的标志物i-NOS的表达,降低树突状细胞成熟标志物CD11c和CD86的表达。体外细胞系实验显示RT-PCR和WB都表明相对于全血,其可以促进巨噬细胞M2极化,并且抑制巨噬细胞经典炎症相关通路。在树突状细胞DC2.4中,RT-PCR显示i-PRF抑制了细胞内Cd86、MhcⅡ、Tlr4和Traf6的表达,WB实验表明DC2.4胞内的NF-κB通路被i-PRF所抑制。结论:i-PRF可以减少损伤组织的炎症细胞浸润,并通过抑制树突状细胞成熟和促进巨噬细胞M2向极化来发挥其抗炎作用。第三部分研究目的:探究液态PRF（Liquid-PRF）对于牙周韧带细胞生物学行为的影响材料与方法:首先提取PDLCs,然后将其与提前制备的液体PRF进行共培养。通过CCK-8实验检测液体PRF对于PDLCs增殖潜力的影响;然后通过Transwell和划痕实验检测PDLCs的迁移能力的变化;在矿化培养基诱导条件下,分别于7天和14天后进行ALP染色和茜素红染色及定量分析检测其成骨向分化能力,同时通过RT-PCR检测成骨分化标志物的基因表达情况。对于液体PRF的抗炎能力,用LPS预处理细胞使其进入炎症状态,再加入液体PRF通过免疫荧光和RT-PCR检测其炎症指标,并在炎症环境下进行矿化诱导,检测其成骨向分化的能力。结果:通过与对照组和经典的PRP相比,CCK8实验表明液体PRF具有显著促进PDLCs增殖的能力。Transwell和划痕实验表明经过24小时的共培养,液体PRF可以促进PDLCs的迁移。在矿化培养基条件下,液体PRF增强了PDLCs的成骨向分化能力。另外,液体PRF可以抑制PDLCs中的p65向细胞核的转移,显著缓解LPS诱导产生的炎症状态。最后的茜素红染色和RT-PCR结果显示液体PRF可以挽救LPS导致的矿化能力减弱。结论:液体PRF可以显著增强PDLCs的增殖、迁移、分化能力,并且可以缓解LPS诱导产生的炎症状态,促进其成骨向分化和形成矿化结节。