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目的： 应用MICM分型联合诊断t（8；21）AML，以提高检出率和准确率；检测p53、Rb及其通路相关基因p14ARF、p16INK4a和p33INGlb在t（8；21）AML的表达和／或缺失情况，探讨这些基因与t（8；21）AML的相关性，为深入研究t（8；21）AML的发生机制提供线索。 方法： 应用形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学（Morphology，Immunology，Cytogenetics and Molecular biology，MICM分型）联合诊断t（8；21）AML；以t（8；21）AML作为研究对象，同时设立t（8；21）-对照和正常对照，聚合酶链反应（Polymerase chain reaction，PCR）检测p14ARF基因缺失情况，半定量逆转录聚合酶链反应（reverse transcript polymerase chain reaction，RT-PCR）检测p14AFRmRNA的相对表达，免疫细胞化学S-P法检测p53、Rb、p16INK4a和p33INGlb蛋白。 结果： 1．47.1％（8／17）以上的t（8；21）AML患者有特征性的形态学改变，100％（17／17）的患者93％以上的细胞MPO染色强阳性。t（8；21）AML主要见于FAB-M2，但也见于其它亚型。 山西医科大学2003局硕士学位论文 2.80%（12/15）的t（8:21）AML伴有典型的t（8:21）染色体易位。 3.t（8:21）‘AML组12例伴t（8:21）染色体易位者、3例无t（8:21）异常核型者一和2例未行染色体分析者，AMLI一ETO融合基因均为阳性，而对照组28例患者无一例阳性。 4.t（8:21）‘组，CD19、CD34的表达明显高于t（8:21）一组（p<0.05），CD19、34共表达率为58.8%（10/17），明显高于t（8:21）一组的3.6%（1/28）（P<0 .001）。 5.AML患者PI4ARFlp外显子总缺失率为9.1%（5/55）。8例正常对照无一例缺失，19例t（8:21）‘患者2例缺失（10.5%），36例t（8:21）一患者3例缺失（8 .3%），三组比较无统计学意义（p>0 .05）。 6.t（8;21）‘AMLp14ARFmRNA、突变型 p53蛋白的表达水平与正常人接近（p>0.05），而明显低于t（8;21）一组（P<0.05）。两者的表达在AMLFAB分型各组无差别（p>0.05）。 7.AML患者pR匕总缺失率为13.2%（5/38）。10例t（8:21）‘患者和8例正常人无一例缺失，28例t（8;21）一患者5例缺失，三组比较无统计学意义（p>0 .05）。 8.t（8:21）‘和t（8:21）一组p16xNK4a蛋白的表达均低于正常组，有统计学意义（p<0 .05）;其中t（8;21）‘组又略低于t（8;21）一组，但两组比较无统计学意义（p）0.05);AMLFAB分型各组中，从患者p16INK4a蛋白的表达明显高于MZ和呱、M:（p<0.05）组。44.4%（4/9）的t（8:21）‘AML患者同时伴有pl4ARFmRNA和p16INK4a蛋白表达的缺失。 9.p33工NGlb蛋白主要见于正常人和AML患者骨髓单个核细胞的核内。p33工NG比蛋白的核表达在t（8;21）‘AML、t（8;21）一AML和正常人之间无差别（p>0.05），在AM【患者FAB分型各组亦无差别（p>0.05）。p33INGlb蛋白的核表达与浆表达呈负相关（p<0 .05）。 一2- 山西医科大学2003局硕士学位论文结论: 1 .t（8;21）AML具有特征性的形态学、细胞遗传学、免疫学和分子牛物学改变。应用MICM分型联合诊断t（8;21）AML，能提高t（8;21）AML的检出率和诊断准确率。在MICM分型中，应用巢式RT一PCR检测AMLI一ETO融合基因具有十分重要的地位。 2.p53基因突变、p14AI作基因和I{b蛋白缺失在t（8;21）ALML中不常见，提示这些基因结构的异常与t（8;21）叭ML的发生发展关系不大。 3.t（8:21）‘AMLp14ARF mRNA低表达，可能是t（8;21）‘AML细胞恶性转化的重要分子机制之一，且这种表达低下可能是其融合蛋白AMLI一ETO抑制ARF基因转录的结果，是AML卜曰O致癌的重要途径之一。 4.pl6INK4a蛋白在t（8:22）‘和t（8;22）AMIJ患者体内低水平表达，提示p16INK4a基因表达缺陷可能是、（8;21）‘AML的重要附加突变事件之一，是包括t（8;21）‘AML在内的AML细胞癌变进程中的重要分子事件之一。 5.pl4ARFmRNA和pl6INK4a蛋白表达同时缺失可能在t（8;21）‘AML的发生发展过程中起着不可低估的作用。 6，p33工NGlb蛋白主要在正常人和AML患者骨髓单个核细胞的核内发挥作用。t（8;21）‘及t（8;21）一AMLp33INGlb蛋白的表达和定位无明显异常，表明p33INGlb基因结构和功能异常不是AML（包括t（8;21）‘AML）细胞癌变的重要原因。