背景与目的结核病是一种对人类健康及社会稳定构成严重威胁的传染性疾病。随着耐药结核菌的出现及AIDS的流行和结核菌的共同感染,结核成为全球范围对人类最具威胁性的感染性疾病之一。据WHO统计,全球约1/3的人口感染结核分枝杆菌(MTB),每年新增900万,并有300万人死于该病。结核性脑膜炎(TBM简称结脑)是常见的由结核分枝杆菌侵犯中枢神经系统造成的感染性疾病,由于结脑是一种能治愈的中枢神经系统感染性疾病,在早期阶段进行特异性的治疗是非常有效的,所以其预后的关键在于早期诊断、及时治疗。罗氏(LowensteinJensen)培养法是目前检测结核分枝杆菌的公认标准,是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据,也是考核疗效,评价治疗效果的可靠标准。但所需时间长(1-2月),且阳性率仅20-30%,不利于指导临床用药。常规涂片抗酸染色虽然快速、便宜,但阳性率很低,不能区分活菌和死菌。核酸扩增检测方法快速,准确,但成本高昂,对实验室条件要求较高。因此开发一种快速、准确的结核分枝杆菌检测方法是临床亟待解决的问题,近年来新兴起的噬菌体生物扩增法(phageamplified biologically assay,PhaB)能快速准确地检测结核分枝杆菌,使得结核病的快速诊断和早期治疗成为可能。本研究拟通过脑脊液噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌联合脑脊液细胞学动态观察,对指标进行相关性分析。力图找出一个对结脑早期诊断有意义的实验室诊断方法,以期为结脑的早期诊断提供依据。探讨该方法在结脑诊断和治疗中的临床应用价值。材料与方法病例组(结脑组)共86例,男52例,女34例,年龄15-82岁,平均39.94±11.19岁;对照组1(中枢神经系统感染非结脑组)共40例,男13例,女27例,年龄12-68岁,平均31.96±18.03岁;对照组2(正常对照组)共20例,男11例,女9例,年龄9-57岁,平均26.44±12.22岁。患者选取郑州大学第一附属医院2007-2008年呼吸内科、神经内科门诊及住院患者,所有病例均根据相应病史、临床表现及影像学、实验室检查确诊为结脑。所有病例腰穿后进行脑脊液常规、生化、细胞学检查以及墨汁、抗酸染色并进行结核分枝杆菌快速培养。结果1.结脑组脑脊液白细胞数增高80例(93.0%);蛋白增高76例(88.4%);氯化物降低50例(58.1%);糖降低52例(60.4%)。对照组1白细胞数增高21例(52.5%);糖降低8例(20.0%);蛋白增高15例(37.5%);氯化物降低9例(22.5%)。对照组2白细胞数增高2例(10.0%),其他结果均正常。结脑组白细胞数升高和葡萄糖呈中度下降,生化改变以蛋白质明显升高和氯化物的明显下降为主,脑脊液常规及生化检查是结脑诊断的基础。细胞学检查结脑组脑脊液呈混合性细胞反应的72例(83.7%);对照组1脑脊液呈混合性细胞反应的8例(20%),对照组2为正常细胞学分类,结脑患者更易出现混合细胞反应。2.噬菌体生物扩增法检测27例结核分枝杆菌培养阳性,阳性率31.4%;59例结核分枝杆菌培养阴性(68.6%)。对照组1结核分枝杆菌培养阳性5例,阳性率12.5%;35例结核分枝杆菌培养阴性(87.5%)、对照组2结核分枝杆菌培养均阴性,与结脑组比较均有显著差异(P＜0.05)。涂片抗酸染色检查阳性仅4例(4.65%),阴性82例(95.3%)与结脑组比较有显著差异(P＜0.05)。用噬菌体法培养能在18-24小时内观察结果,缩短结核分枝杆菌培养时间。结论1结脑组白细胞数升高和葡萄糖呈中度下降,生化改变以蛋白质明显升高和氯化物的明显下降为主,细胞学呈混合性细胞反应。2噬菌体生物扩增法与传统结核分枝杆菌培养、直接涂片法相比,可以简便、快速地检测结核分枝杆菌,全程只需18-24小时,并且具有较高的敏感性和特异性,对结脑诊断和治疗有很好的应用价值。3在脑脊液细胞学的基础上联合噬菌体生物扩增法快速培养,对结脑的鉴别诊断及病情转归判断均有很高的实用价值。为结脑的早期诊断提供了依据。