本试验旨在探究奇链支链脂肪酸（OBCFA）与瘤胃微生物蛋白（MCP）的相关关系,以期为更加高效地预测MCP提供新方法,并进一步阐明OBCFA作为标记物的机理及可行性。试验一:体外发酵不同比例的纤维和淀粉对OBCFA、瘤胃发酵参数、MCP和瘤胃细菌菌群的影响及相关关系的研究体外发酵不同比例的纤维素（F）与淀粉（S）,分别为F:S=0:100、25:75、50:50、75:25、100:0,于发酵6、12、18、24 h后进行p H、挥发酸（VFA）、氨态氮（NH₃-N）、MCP和OBCFA的测定,并通过高通量技术分析微生物菌群的变化。结果表明,各OBCFA含量在不同F:S下均存在显著差异（P<0.05）。发酵24 h时,F:S=75:25组iso C15、anteiso C15、C17含量较高,F:S=50:50组anteiso C17含量和乙酸的摩尔比例高于其他组,C15含量和丙酸摩尔比例在F:S=100:0组最高,而F:S=0:100组MCP、iso C16和iso C17含量最高。随着淀粉含量的增加,NH₃-N浓度下降,而总VFA浓度增加（P<0.05）。当纤维比例≤50%时,变形菌门（Proteobacteria）占据较大比例,而纤维比例>50%组中纤维杆菌门（Fibrobacteres）的相对丰度显著高于其他组（P<0.05）。试验二:瘤胃灌注不同浓度的NH₄HCO₃对瘤胃和乳中OBCFA、瘤胃发酵参数和MCP的影响及相关关系的研究选择3头安装永久性瘘管的荷斯坦泌乳牛,采用3×3拉丁方试验设计,将3种剂量的NH₄HCO₃（0、112和224 g/d）进行瘤胃灌注。采集12 h内每隔2 h的瘤胃样品,并测定p H、VFA、NH₃-N、MCP和OBCFA。结果表明,随着NH₄HCO₃浓度增加,瘤胃内iso C14和iso C17和总异构脂肪酸的含量显著增加（P<0.05）,微生物蛋白的含量趋于提高（P=0.06）,但NH₄HCO₃的浓度对瘤胃p H、NH₃-N和VFA摩尔比例均没有显著影响（P>0.05）。通过相关性分析发现,瘤胃（或乳脂）OBCFA含量与瘤胃发酵参数、MCP和瘤胃细菌菌群存在较强的相关关系。其中,拟杆菌门（Bacteroidetes）与iso C17和C17呈负相关（r=-0.31～-0.54,P<0.05）,变形菌门（Proteobacteria）与iso C16正相关（r=0.47,P<0.05）,厚壁菌门（Firmicutes）与iso C15、anteiso C15、iso C17、anteiso C17负相关（r=-0.30～-0.35,P<0.05）;纤维杆菌门（Fibrobacteres）与C15及其异构体正相关（r=0.43～0.80,P<0.05）。瘤胃C17与p H和NH₃-N均存在相关关系,C15与乙酸显著相关,而异构脂肪酸与丙酸显著相关（P<0.05）。瘤胃支链脂肪酸与MCP显著正相关（r=0.44～0.79,P<0.05）。而乳中anteiso C17与p H显著负相关（r=-0.76,P<0.05）,C17及其异构体与NH₃-N正相关（r=0.64～0.84,P<0.05）,anteiso C15与乙酸呈负相关（r=-0.89,P<0.05）,与MCP正相关（r=0.78,P<0.05）,并可通过回归分析建立较为准确的预测方程。综上所述,本研究得到如下结论:（1）纤维和淀粉比例对OBCFA、MCP、瘤胃发酵参数和细菌菌群相对丰度均存在显著影响。（2）瘤胃灌注高浓度NH₄HCO₃能够显著增加瘤胃内iso C14和iso C17和总异构脂肪酸的含量,使MCP的含量趋于提高。（3）瘤胃OBCFA与菌群相对丰度显著相关,可作为瘤胃细菌标记物。（4）瘤胃和奶中anteiso C15与MCP显著相关,能够用来预测MCP。