前列腺癌(Prostatic carcinoma,PCa)是欧美地区男性最常见的恶性肿瘤,也是发达国家男性癌症死亡的主要因为之一。随着人均寿命的延长和饮食结构的改变,近年来我国的发病率有逐渐增高趋势。由于PCa的生物学特性复杂,早期多无症状,病理论断困难,发现时多属晚期,预后不良,发生转移后5年生存率仅20-40％,因此早期诊断至关重要。我国不但人口基数大,而且PCa早期诊断技术力量薄弱,患者就诊时大多数已发生转移。因此,转移性PCa已经成为威胁我国老年男性生命安全的常见恶性肿瘤之一。前列腺癌的临床分期目的是指导选择治疗方法和评价预后,分期不同的PCa治疗方法和预后迥然不同。盆腔淋巴结和骨骼转移是前列腺癌最早和最常见出现转移部位。一旦出现淋巴结转移,患者10年生存率仅22％-49％,绝大多数丧失了根治性手术治疗的机会。而早期局限性PCa患者可行前列腺癌根治术,术后10年肿瘤特异生存率可达92％-97％。因此,对PCa患者进行准确分期和进展转移的诊断预测对于治疗方法的选择及预后判断具有十分重要意义。大量临床研究表明：早期PCa经过治疗可取得很好疗效,而肿瘤的进展、转移是最终导致PCa患者死亡主要因为。寻找肿瘤进展转移的早期诊断标志物及治疗靶标是防治PCa进展转移和提高患者生存率的关键所在,Pca发生转移进展的正确判断对肿瘤的治疗方法选择及预后判断都具有十分重要意义。　　 目的：⑴建立前列腺癌组织2-D DIGE图谱,进行差异蛋白质组分析局限性及转移组前列腺癌间的差异蛋白质点,为下一步质谱鉴定奠定基础。⑵对前列腺癌进展转移的差异蛋白进行质谱鉴定。第三部分主要临床验证成功鉴定的差异蛋白在前列腺癌转移组织的表达及其意义。　　 方法：首先从病理证实的良性前列腺增生症组织,局限组和转移性前列腺癌组织获得样本,采用手工显微切割方法获取癌组织,每组10例,加入双向电泳蛋白裂解液提取总蛋白并纯化后定量,样本分组后经用Cy荧光剂进行荧光素标记,应用pH3—10的IPG胶条等电聚焦,SDS—PAGE电泳,Typhoo9400荧光扫描及DeCyder全自动软件分析,找出各组间2倍以上的显著差异点(P<0.05),将局限组与转移组间的差异蛋白质点取出后用ABI4800质谱仪进行质谱鉴定,选取其中一个差异蛋白质点在临床良性前列腺增生、局限性和转移性前列腺癌标本用免疫组化SP方法进行验证。　　 结果：经手工显微切割后,每组取10例样本。经2-D DIGE双向电泳,pH3—10胶条经计算机凝胶图像分析软件DeCyder分析可获得2500—3000的蛋白点,6块凝胶平均分离2785±168个蛋白点,蛋白点匹配率约为88％。正常良性前列腺增生组织与局限组,局限组和转移组间分别得到了205,96个2.0倍以上差异的有显著性意义(P<0.05)的差异蛋白质点。对局限组与转移组间差异蛋白质点取点,经ABI4800质谱鉴定,成功鉴定出77差异蛋白质,其中上调成功鉴定49个,下调成功鉴定28个。蛋白种类包括:细胞骨架或结构蛋白,能量代谢蛋白、运输蛋白、水解酶类、信号转导蛋白及与转移有关蛋白等六大类重要蛋白。免疫组化验查结果证实,在3种组织间转移相关蛋白Ezrin的表达有显著性差异(P<0.01)。随着Pca的Gleason评分和临床分期的增加Ezrin的阳性率也相应增高。转移组前列腺癌组织中的Ezrin表达水平明显高于局限组前列腺癌(P<0.01)。晚期前列腺癌全部表达阳性且强阳性率高。Ezrin表达与Gleason评分在前列腺癌组织中的一致,呈正相关(r=0.668,P<0.001)。Ezrin表达与PSA水平随PSA升高而升高,呈正相关(r=0.76,P<0.001)。　　 结论：应用2D-DIGE方法成功鉴定出与前列腺癌进展转移密切相关的蛋白标记物,这些标记物的开发和研究将为前列腺癌的转移的诊断、检测指标,为预防和治疗提供靶标,具有十分重要的理论和现实价值。前列腺癌发生进展转移是多种重要蛋白表达的受到调节和改变造成。这些蛋白类型包括:细胞骨架蛋白、能量代谢蛋白,信号转导蛋白,转移蛋白等种类。前列腺癌的转移差异蛋白组对前列腺癌进展转移的监测具有重要的理论和临床实用价值。Ezrin表达上调是前列腺癌进展转移重要因为之一,可作为前列腺癌进展转移的诊断检测瘤标。Ezrin可作为前列腺癌进展转移潜在治疗靶标。