一株脂肽生物表面活性剂产生菌筛选及其脂肽性质研究

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:bxinliy
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本课题研究了生物表面活性剂产生菌的筛选,生物表面活性剂的理化性质及小鼠毒性,相关研究如下:(1)研究了合肥工业大学学生食堂馨园餐厅及工大怡园餐厅下水道附近的污水及土壤、合肥市石油库附近长期受油污染土壤、山东东营胜利油田被石油长期污染的油土样和油水样共11个样品,经富集培养、血平板、油平板等步骤,从中分离筛选出一株产脂肽的生物表面活性剂菌株H-02,其排油活性较好,排油圈直径达到9.2 cm。对菌株H-02进行了形态、生理生化和16S rDNA序列分析鉴定,得出菌株H-02是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis H-02)。其所产脂肽具有较好的乳化性能,能使乳化液保持稳定至少10 d以上。(2)通过单因素实验和正交实验研究了各种营养物质和环境因素对菌株H-02发酵生产脂肽表面活性剂的影响。研究并确定了优化的培养基组成为(g/100mL):可溶性淀粉2.5,硝酸铵0.6,硫酸镁0.04,氯化钙0.008,酵母粉0.08,磷酸二氢钾0.24,磷酸氢二钠0.96,初始pH 7.0-7.5;培养条件为:500 mL三角瓶的装液量为150 mL,接种量5.0%,培养温度35℃。在上述条件下,脂肽产量达到了3.18 g/L以上。(3)对菌株H-02所产脂肽的理化性质研究表明,枯草芽孢杆菌H-02所产的生物表面活性剂是一种脂肽类生物表面活性剂,具有很好的表面活性和独特的理化性质。所产的脂肽具有良好的乳化活性和发泡性能,另外还具有抗菌活性。因此,它的应用领域非常广,除可以应用于石油开采外,特别适合于食品工业、医药等领域。脂肽可耐受高温和高浓度盐,尤其是高钙离子,pH适应范围广,pH适应范围为4-10,是一种具有应用潜力的生物表面活性剂。(4)对菌株H-02发酵液的安全性进行了小鼠经口急性毒性和30 d喂养试验,实验结果表明该脂肽对小鼠无明显毒性。
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