【摘 要】
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目的:基于RAS信号通路探讨延龄草皂苷单体化合物TTB1-3对结肠癌CT-26细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移等肿瘤生物学行为的影响。方法:(1)系统溶剂提取、柱色谱分离单体化合物TTB1-3;(2)光镜下观察TTB1-3作用结肠癌细胞CT-26后的细胞数量和形态变化;(3)MTT检测TTB1-3作用CT-26后的细胞存活率;(4)流式细胞术(Flow Cytometry,FC)检测细胞周期阻滞和We
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目的:基于RAS信号通路探讨延龄草皂苷单体化合物TTB1-3对结肠癌CT-26细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移等肿瘤生物学行为的影响。方法:（1）系统溶剂提取、柱色谱分离单体化合物TTB1-3;（2）光镜下观察TTB1-3作用结肠癌细胞CT-26后的细胞数量和形态变化;（3）MTT检测TTB1-3作用CT-26后的细胞存活率;（4）流式细胞术（Flow Cytometry,FC）检测细胞周期阻滞和Western blot检测细胞周期相关蛋白CDK4以及Cyclin D1的表达情况;（5）流式细胞术检测细胞凋亡和Western blot检测凋亡相关蛋白BAX、BCL-2的表达情况;（6）细胞划痕和Transwell侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭情况;（7）Western blot检测RAS信号通路相关蛋白RAS、p-RAS、AKT、p-AKT的表达水平。结果:（1）成功提取分离并鉴定延龄草皂苷单体化合物TTB1-3;（2）TTB1-3作用CT-26细胞24h后细胞数量明显减少,细胞形态变小变圆;（3）随着TTB1-3浓度的不断增加,结肠癌CT-26细胞的存活率不断降低（P<0.01）,半数抑制率IC50分别为1.98μg/m L,2.54μg/m L和12.91μg/m L;（4）TTB1-3能够使CT-26细胞发生周期阻滞,且阻滞在G0/G1期,Western blot实验结果显示CDK4以及Cyclin D1的表达量显著降低（P<0.01）;（5）TTB1-3能够诱导结肠癌CT-26细胞发生凋亡,TTB1-3使凋亡蛋白BAX的表达量增加,抗凋亡蛋白BCL-2的表达量减少（P<0.01）;（6）TTB1-3能够抑制结肠癌CT-26细胞的侵袭和迁移（P<0.01）;（7）TTB1-3使p-RAS、p-AKT蛋白表达显著降低,呈浓度依赖性（P<0.01）。结论:延龄草皂苷单体化合物TTB1-3能够抑制结肠癌CT-26细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导CT-26细胞发生凋亡,其机制与Ras信号通路改变有关。
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