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[目 的]脉络膜的病理性新生血管（Choroidal neovascularization,CNV）是导致失明的主要原因之一,是多种眼底疾病的共同病理特征。目前,CNV的形成机制尚未完全阐明。动物疾病模型是研究CNV发病机制的重要工具。由于非人灵长类动物具有来源少、成本高、饲养困难、造模时间长等缺点,而啮齿类动物和兔子的视网膜结构和眼底血液循环与人类差异大。现已建立的动物模型在CNV相关研究中的应用受到限制。因此,急需建立与人类CNV症状相似的动物模型。树鼩的色觉功能较好,辨色准确率较高,其中视网膜中的细胞主要以视锥细胞为主,感光变化敏感度高,与人类的黄斑区功能很相似。本研究旨在利用氪激光光凝诱导树鼩CNV的形成,通过高通量测序筛选CNV形成的重要调控分子和关键信号通路,为进一步的功能验证提供线索,为研究CNV的发病机制和药物治疗方向及靶点提供依据。[方 法]通过氪激光光凝损伤21只树鼩视网膜,诱导络膜新生血管形成,通过病理切片HE染色和CD31免疫组织化学染色检测光凝术后树鼩视网膜和脉络膜中新生血管的形成及病理变化情况。通过高通量转录组测序获得光凝术后7天、21天、30天脉络膜和视网膜的mRNA表达谱。在此基础上,通过层次聚类分析、加权基因共表达网络分析（Weighted gene co-expression network analysis,WGCNA）、GO功能注释、KEGG功能富集和蛋白-蛋白相互作用网络分析（Protein-Protein interaction,PPI）筛选CNV不同病程中重要的调控基因和关键的信号通路,并通过RT-qPCR验证RNA测序结果。[结 果]病理切片HE染色结果显示光凝损伤7天后,视网膜水肿,脉络膜Haller’s层破坏,脉络膜中可见新生血管形成,于新生血管处可见巨噬细胞和成纤维细胞;光凝损伤14天后,视网膜中可见新生血管形成,导致神经节细胞层（Ganglion cell layer,GCL）被破坏,神经纤维层（Nerve fiber layer,NFL）结构紊乱,脉络膜中新生血管增多,结构破坏加剧;光凝损伤21天后,视网膜中新生血管官腔变大,脉络膜中新生血管附近仍可见成纤维细胞和巨噬细胞,脉络膜结构损伤维持稳定,光凝损伤后30天,视网膜水肿有消退的现象,新生血管处未见明显巨噬细胞及纤维细胞。CD31免疫组织化学染色实验结果显示,光凝术后第7天,巩膜及脉络膜下可见CD31染色阳性的CNV;第14天,视网膜和脉络膜中可见CD31染色阳性的CNV;第21天,视网膜和脉络膜中CD31染色阳性新生血管的管腔变大;第30天,CD31染色阳性的新生血管数量减少。通过光学显微镜对微血管进行计数发现光凝术后微血管密度（Micro vessel density,MVD）高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。光凝术后第14天和第21天MVD明显增多,高于光凝7天组,且第14天与第21天的MVD无显著差异,光凝术后第30天,MVD减少。对光凝术后7天、21天和30天树鼩视网膜和脉络膜组织中mRNA进行高通量测序,在脉络膜中共获得350个差异表达基因（Differential expression genes,DEGs）,其中黄色模块（“ME-yellow”）基因 59 个,蓝色模块（“ME-blue”）基因28个;视网膜中共获得69个,其中淡绿色模块（“ME-turquois”）基因20个。GO和KEGG分析表明,脉络膜中的DEGs主要参与细胞膜的运输;“ME-blue”中的DEGs主要参与IgA产生、抗原呈递和细胞粘附分子信号转导相关的通路;“ME-yellow”中的DEGs参与脂肪酸代谢和PPAR信号通路,而“ME-turquois”中的DEGs参与GABAergic突触、神经活性配体-受体相互作用、胆碱能突触和逆行内源性大麻素信号通路。PPI网络分析表明,核糖体蛋白家族基因（RPL31、RPL7、RPL26L1,RPL19）是“ME-blue”的关键因子,酰基辅酶A基因超家族（ACACA、ACAT1 ACAA2,ACACB）和FASN基因是“ME-yellow”的关键因子,溶质载体基因家族（SLC17A6、SLC32A1、SLC12A5、SLC6A1）和补体基因（C4A,C3,C2）是“ME-turquois”的关键因子。[结 论]1.本研究通过波长为647nm的氪激光,光凝斑直径为50μm,曝光时间为0.01～0.05s,激光能量为350mw,可诱导树鼩CNV的形成,其诱发时间短,病理特征和人类相似,是研究CNV发病机制和药物治疗方向及靶点的理想动物模型。2.通过高通量转录组测序获得CNV不同病程（7天、21天、30天）视网膜和脉络膜mRNA表达图谱,经生物信息学分析发现核糖体家族基因（RPL31、RPL7、RPL26L1,RPL19）、溶质载体家族基因（SLC17A6、SLC32A1、SLC12A5、SLC6A1）、酰基辅酶A超家族基因（ACACA、ACAT1 ACAA2,ACACB）和补体基因（C4A,C3,C2）为树鼩CNV形成过程中的重要调控分子,脂肪酸代谢通路和细胞黏附分子信号为本研究相关的显著富集通路,推测其在树鼩CNV发生发展过程中可能发挥重要作用,为进一步研究其功能提供了理论基础,为研究CNV形成机制和药物治疗方向及靶点提供了依据。