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南方夏季高温高湿天气容易诱导奶牛产生热应激，处于泌乳高峰期的奶牛对高温应激尤其敏感。本试验旨在研究夏季高温高湿的环境因素及喷淋措施对泌乳期荷斯坦奶牛生产性能及粪样菌群结构和多样性的影响。为夏季南方地区缓解奶牛热应激及提高生产效率提供新思路，为奶牛健康养殖技术研发、环境控制装备的研制提供理论依据。 本试验选用体重、胎次（1-2胎）、泌乳天数（120-180天）均接近的泌乳中期荷斯坦奶牛48头，随机分为3组:春季组、夏季高温高湿组和夏季喷淋组，每组16头。春季组选择在春季舒适环境（日均THI为59.0），夏季高温高湿组和喷淋组选择在夏季炎热条件下进行（日均THI为84.7），且夏季喷淋组给奶牛增加喷淋+风扇降温措施。每组奶牛均饲喂TMR日粮，自由饮水。整个试验周期为90天。试验结果如下: (1)南方夏季高温高湿会导致奶牛出现热应激，夏季组奶牛（包括高温高湿组和喷淋组）早(06:00)、中(12:00)、晚(18:00)三个时间点的呼吸频率和直肠温度均极显著高于(P＜0.01)春季组。且夏季喷淋组奶牛的呼吸频率和直肠温度较高温高湿组来说有极显著降低(P＜0.01)。 (2)与春季组相比，夏季高温高湿组及喷淋组的DMI、DM、CP、EE、NDF和ADF的消化率均有显著下降(P＜0.05);且夏季喷淋组奶牛的DMI、DM及NDF消化率与高温高湿组奶牛相比均有显著升高（P＜0.05）。夏季高温高湿组及喷淋组的日产奶量及4％标准乳含量均有极显著下降(P＜0.01)，尿素氮水平均有极显著升高(P＜0.01);夏季高温高湿组奶牛的乳脂率显著低于（P＜0.05）春季组，下降了8.8％。 (3)与春季组相比，夏季高温高湿组及喷淋组奶牛的站立时间均有极显著增加(P＜0.01);反刍时间、咀嚼时间及咀嚼频率均有极显著降低(P＜0.01)。夏季喷淋组奶牛的饮水次数和排尿次数与另外两组相比均有极显著降低(P＜0.01)。与春季组相比，夏季高温高湿组奶牛的采食时间有极显著下降(P＜0.01)，而喷淋组无显著差异(P＞0.05);夏季高温高湿组奶牛体况评分显著低于(P＜0.05)春季组，且喷淋组奶牛体况评分与另外两组均无差异显著性(P＞0.05)。 (4)与春季组相比，夏季高温高湿组奶牛血清中SOD、T-AOC、GSH-Px、CAT及ALP浓度均有显著降低(P＜0.05)，MDA浓度有显著升高(P＜0.05);夏季喷淋组SOD、T-AOC、GSH-Px及ALP浓度相比于高温高湿组来说均有显著上升(P＜0.05)，MDA浓度有显著下降（P＜0.05）。 (5)与春季组相比，夏季高温高湿组奶牛血清中Cor和E浓度均有显著升高(P＜0.05)，T3、P4、LH及PRL均有极显著的降低（P＜0.01），T4有显著降低(P＜0.05)。夏季喷淋组与高温高湿组相比，Cor浓度有极显著下降(P＜0.01)，P4、LH和PRL有极显著增加(P＜0.01)，T4有显著增加(P＜0.05);Cor、E和T3与春季组相比无显著差异(P＞0.05)。与春季组相比，夏季高温高湿组奶牛MCHC和RDW均有显著降低(P＜0.05)。夏季喷淋组与春季组相比，奶牛RBC有显著增加(P＜0.05)，HCT有极显著增加(P＜0.01)，MCH和MCHC均有极显著减少(P＜0.01)。 (6)与春季组相比，夏季高温高湿组奶牛血清中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α及ET浓度均有极显著升高(P＜0.01)，IgG浓度有显著降低(P＜0.05);夏季喷淋组奶牛血清中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α及ET浓度均极显著低于(P＜0.01)夏季高温高湿组，IgG浓度也有显著增加(P＜0.05)。 (7)春季组奶牛粪样有898个OTUs，夏季高温高湿组有874个，夏季喷淋组有929个。同时，本研究还检测出三试验组间具有显著差异的12种优势菌属，分别为消化链球菌属、类梭菌属、梭状芽胞杆菌属、气杆菌属、瘤胃球菌属UCG-005、理研菌属、Christensenellaceae_R-7_group、瘤胃球菌属UCG-010、瘤胃球菌属UCG-013、土壤杆菌属及拟杆菌属。其中夏季高温高湿热应激会导致奶牛粪样中Peptostreptococcaeae、Paeniclostridium、Clostridium_sensu_stricto_1、Turicibacter及Solibacillu含量显著增加;Ruminococcaceae_UCG-005、Rikenellaceae_RC9_gut_group、Christensenellaceae_R-7_group、Prevotellaceae_UCG-003、Ruminococcaceae_UCG-010、Ruminococcaceae_UCG-013及Bacteroides含量显著减少。 综上所述，本试验的结论是:(1)南方夏季高温高湿(日均THI达到84.7)的环境，会造成泌乳奶牛热应激，导致奶牛直肠温度和呼吸频率极显著增加;显著降低奶牛营养物质消化率及日产奶量;激活奶牛下丘脑—垂体—肾上腺轴，增加血清应激激素浓度，并伴随机体氧化还原失衡，系统免疫机能受损;消化道微生物多样性减少同时结构组成也发生改变。(2)在夏季（日均THI达到84.7）环境下，给牛舍安装喷淋+风扇的防暑降温设备能明显改善奶牛生理状况;提高热应激奶牛生产性能;降低应激激素Cor含量，提高雌激素P4、LH和PRL水平;调节机体氧化还原平衡;下调奶牛血清炎性因子水平，维持机体免疫稳态;同时还提高奶牛消化道微生物多样性，维持消化道优势菌属。本研究为缓解高温高湿造成的奶牛热应激、奶牛健康养殖技术研发以及环境控制装备的研制提供理论依据，对实际生产也具有十分重要的指导意义。